[发明专利]一种核酸适配体修饰磁性金属有机骨架介质的制备及应用在审
申请号: | 201510481684.6 | 申请日: | 2015-08-07 |
公开(公告)号: | CN105056915A | 公开(公告)日: | 2015-11-18 |
发明(设计)人: | 张仟春;郭璇;陈明华;易君明;龙巍然;张国义 | 申请(专利权)人: | 兴义民族师范学院 |
主分类号: | B01J20/286 | 分类号: | B01J20/286;B01J20/28;B01J20/30 |
代理公司: | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人: | 华辉 |
地址: | 562499 贵州省黔西*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 核酸 适配体 修饰 磁性 金属 有机 骨架 介质 制备 应用 | ||
1.一种核酸适配体修饰的磁性金属有机骨架材料的制备方法,按以下步骤进行:
(1)将Fe2+和Fe3+混合,加入氨水生成磁性Fe3O4,然后采用Fe3O4与正硅酸乙酯在加入氨水引发制备Fe3O4@SiO2,再采用Fe3O4@SiO2与APTES、无水乙醇反应生成NH2-Fe3O4粒子;
(2)将硝酸铬于超纯水中充分溶解,依次加入对苯二甲酸和氢氟酸,混合均匀,得到合成MIL-101的反应溶液;
(3)在(2)所述合成MIL-101的反应溶液中加入NH2-Fe3O4粒子,混合均匀,放入水热反应釜中密封,水热合成反应制备磁性MIL-101;
(4)将上述制备的磁性MIL-101加入PBS缓冲液中,活化反应,加入链霉亲和素溶液,室温振摇反应,制得磁性MIL-101/链霉亲和素,PBS缓冲液清洗,低温保存;
(5)取上述制备所得磁性MIL-101/链霉亲和素,加入Tris-HCl缓冲溶液,混合均匀后加入赭曲霉素A核酸适配体溶液,37℃振摇反应,再用Tris-HCl缓冲溶液清洗,制得所述核酸适配体修饰的磁性金属有机骨架材料,于缓冲液中低温保存。
2.根据权利要求1所述的核酸适配体修饰的磁性金属有机骨架材料的制备方法,其特征在于:所述步骤(3)的反应温度为200℃,反应时间为8h,NH2-Fe3O4的用量为90mg。
3.根据权利要求1所述的核酸适配体修饰的磁性金属有机骨架材料的制备方法,其特征在于:所述步骤(4)的反应温度为25℃,反应溶液为PBS缓冲液,pH为6.0,反应时间为24h,链霉亲和素用量为50μL,浓度为5mg/L。
4.根据权利要求1所述的核酸适配体修饰的磁性金属有机骨架材料的制备方法,其特征在于:步骤(5)中所述的Tris-HCl缓冲溶液为pH=7.4,30mmol,赭曲霉素A适配体用量为1.25nmol,反应温度37℃,反应时间24h。
5.根据权利要求1所述的核酸适配体修饰的磁性金属有机骨架材料的制备方法,其特征在于:所述步骤(4)中,磁性MIL-101的用量为10mg。
6.根据权利要求1所述的核酸适配体修饰的磁性金属有机骨架材料的制备方法,其特征在于:所述步骤(5)中磁性MIL-101/链霉亲和素用量为10mg。
7.根据权利要求1所述的核酸适配体修饰的磁性金属有机骨架材料OTAApt-MMIL-101的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中所述Fe2+和Fe3+的摩尔比为1:2。
8.按照上述权利要求1~7中任意一条所述的方法制备得到的核酸适配体修饰的磁性金属有机骨架材料。
9.根据权利要求8所述的核酸适配体修饰的磁性金属有机骨架材料,其特征在于:所述核酸适配体修饰的磁性金属有机骨架材料,具有在水、甲醇、乙腈、乙酸溶剂中具有良好的耐溶剂性能,确保材料可以重复使用及较好的重现性。
10.根据权利要求8所述的核酸适配体修饰的磁性金属有机骨架材料,其特征在于:所述核酸适配体修饰的磁性金属有机骨架材料显示出磁分离的简单,对小分子赭曲霉素A具有特异性识别性能。
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