[发明专利]GNAS 基因突变检测试剂有效
| 申请号： | 201510482091.1 | 申请日： | 2015-08-03 |
| 公开（公告）号： | CN105112514B | 公开（公告）日： | 2019-04-19 |
| 发明（设计）人： | 丁少峰;刘强 | 申请（专利权）人： | 天津精耐特基因生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12N15/11 |
| 代理公司： | 天津市三利专利商标代理有限公司 12107 | 代理人： | 李蕊 |
| 地址： | 300400 天津市北辰区*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | gnas 基因突变 检测 试剂 | ||
1.GNAS 基因突变检测试剂盒，其特征在于：是采用以焦磷酸化激活的聚合反应为基础的核酸扩增技术来扩增体细胞GNAS基因，从而实现对扩增的片段3种基因突变R201H、R201L和R201C的检测并以辅以GNA基因保守序列基因组DNA总量检测作为内对照；所述试剂盒包括光学孔板及反应孔中标记的PAP聚合酶、缓冲剂、特异性引物、dNTP和PPi和光学封板膜，所述光学孔板为光学96孔板，每4孔一组，所述PAP聚合酶是含F667Y 突变的Taq聚合酶、所述缓冲剂是指每1x缓冲剂含有50mM Tris-HCl、10mM (NH4)2SO4、2mM MgCl2, pH 8.0；所述特异性引物为突变体-1引物、 突变体-2引物、 突变体-3引物、总量DNA引物和野生型GNAS基因引物，所述突变体-1 R201H为CGT to CAT，突变体-2 R201L为CGT to CTT，突变体-3R201C为CGT to TGT，其中，
所述突变体-1引物的序列为5’-TGGTCTCAAAGATTCCAGAAGTCAGGACAddT-3’；
所述突变体-2引物的序列为5’-TGGTCTCAAAGATTCCAGAAGTCAGGACAddA-3’；
所述突变体-3引物的序列为5’-GGTCTCAAAGATTCCAGAAGTCAGGACACddA-3’；
所述总量DNA引物的序列为5’-CTTGGTCTCAAAGATTCCAGAAGTCAGGAddC-3’；
所述野生型GNAS基因引物的序列为5’-CACCAACTGTTTCGGTTGGCTTTGG/FAM-dT/G-3’。
2.根据权利要求1所述的GNAS 基因突变检测试剂盒，其特征在于：采用荧光标记的LUX引物发出实时荧光信号的焦磷酸化激活聚合反应, 其LUX 引物的3’末端是双脱氧核苷酸ddNMP。
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