[发明专利]碳酸镧分离富集核酸的方法及用途有效
申请号: | 201510482164.7 | 申请日: | 2015-08-07 |
公开(公告)号: | CN105087545B | 公开(公告)日: | 2018-03-27 |
发明(设计)人: | 康晓燕;贺安琪;徐怡庄 | 申请(专利权)人: | 宁海德宝立新材料有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京康思博达知识产权代理事务所(普通合伙)11426 | 代理人: | 刘冬梅,路永斌 |
地址: | 315602 浙江省宁波市宁海县*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 碳酸 分离 富集 核酸 方法 用途 | ||
1.使用碳酸镧进行核酸分离富集的方法,其特征在于,该方法包括:
步骤1),将碳酸镧固体高速剪切处理,制备成粒径为100~500nm的碳酸镧纳米颗粒,所述碳酸镧为La2(CO3)3·xH2O,其中x值为8;
步骤2),将待分离富集的核酸样品溶于pH值为5.5~6.0的缓冲溶液一中,所述缓冲溶液一为六次甲基四胺-盐酸缓冲溶液,所述核酸为DNA,加入步骤1)中所述碳酸镧纳米颗粒,搅拌0.2~2.5小时,离心分离,得到固相部分一,所述固相部分一为碳酸镧纳米颗粒-核酸复合物;
步骤3),将步骤2)中所述固相部分一用蒸馏水清洗后加入到pH值为8.0~8.5的缓冲溶液二中,所述缓冲溶液二为EDTA缓冲溶液,搅拌0.1~1.5小时,离心分离,得到上清液和固相部分二,所述上清液为分离富集后的核酸溶液;
步骤4),将步骤3)中所述固相部分二使用pH值为0.3~2.0的稀酸进行淋洗,蒸馏水清洗至中性,离心分离,得到固相部分三,所述固相部分三为回收的碳酸镧纳米颗粒。
2.根据权利要求1所述的使用碳酸镧进行核酸分离富集的方法,其特征在于,步骤2)中搅拌0.3~1.5小时,步骤3)中搅拌0.2~0.5小时。
3.根据权利要求1所述的使用碳酸镧进行核酸分离富集的方法,其特征在于,步骤4)中所述稀酸使用稀盐酸、稀硝酸、稀高氯酸。
4.根据权利要求1所述的使用碳酸镧进行核酸分离富集的方法,其特征在于,步骤2)、步骤3)和步骤4)中所述离心分离的转速为15000~25000r/min。
5.根据权利要求4所述的使用碳酸镧进行核酸分离富集的方法,其特征在于,步骤2)、步骤3)和步骤4)中所述离心分离的转速为18000~22000r/min。
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