[发明专利]碳酸镧分离富集核酸的方法及用途有效

专利信息
申请号: 201510482164.7 申请日: 2015-08-07
公开(公告)号: CN105087545B 公开(公告)日: 2018-03-27
发明(设计)人: 康晓燕;贺安琪;徐怡庄 申请(专利权)人: 宁海德宝立新材料有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 北京康思博达知识产权代理事务所(普通合伙)11426 代理人: 刘冬梅,路永斌
地址: 315602 浙江省宁波市宁海县*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 碳酸 分离 富集 核酸 方法 用途
【权利要求书】:

1.使用碳酸镧进行核酸分离富集的方法,其特征在于,该方法包括:

步骤1),将碳酸镧固体高速剪切处理,制备成粒径为100~500nm的碳酸镧纳米颗粒,所述碳酸镧为La2(CO3)3·xH2O,其中x值为8;

步骤2),将待分离富集的核酸样品溶于pH值为5.5~6.0的缓冲溶液一中,所述缓冲溶液一为六次甲基四胺-盐酸缓冲溶液,所述核酸为DNA,加入步骤1)中所述碳酸镧纳米颗粒,搅拌0.2~2.5小时,离心分离,得到固相部分一,所述固相部分一为碳酸镧纳米颗粒-核酸复合物;

步骤3),将步骤2)中所述固相部分一用蒸馏水清洗后加入到pH值为8.0~8.5的缓冲溶液二中,所述缓冲溶液二为EDTA缓冲溶液,搅拌0.1~1.5小时,离心分离,得到上清液和固相部分二,所述上清液为分离富集后的核酸溶液;

步骤4),将步骤3)中所述固相部分二使用pH值为0.3~2.0的稀酸进行淋洗,蒸馏水清洗至中性,离心分离,得到固相部分三,所述固相部分三为回收的碳酸镧纳米颗粒。

2.根据权利要求1所述的使用碳酸镧进行核酸分离富集的方法,其特征在于,步骤2)中搅拌0.3~1.5小时,步骤3)中搅拌0.2~0.5小时。

3.根据权利要求1所述的使用碳酸镧进行核酸分离富集的方法,其特征在于,步骤4)中所述稀酸使用稀盐酸、稀硝酸、稀高氯酸。

4.根据权利要求1所述的使用碳酸镧进行核酸分离富集的方法,其特征在于,步骤2)、步骤3)和步骤4)中所述离心分离的转速为15000~25000r/min。

5.根据权利要求4所述的使用碳酸镧进行核酸分离富集的方法,其特征在于,步骤2)、步骤3)和步骤4)中所述离心分离的转速为18000~22000r/min。

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