[发明专利]具有促进海参生长和抗逆作用的卡拉胶寡糖及其制法和应用

说明书

本发明提供一种促进海参生长和抗逆作用的卡拉胶寡糖及其制备方法和应用，涉及微生物领域。通过本发明方法得到的卡拉胶寡糖，可用于食品、饲料添加剂，保健品和生物农药等，应用广泛。以该卡拉胶寡糖作为饲料添加剂饲喂海参，海参生长情况较好，刺坚挺，活动自如，摄食力强，该寡糖不但对海参生长具有明显的促进作用，还能够提高海参的抗逆作用，增加其抗逆性和免疫机能，是理想的海参饵料添加剂。

技术领域

本发明涉及微生物领域，具体涉及一种具有促进海参生长和抗逆作用的卡拉胶寡糖及其制备方法和应用。

背景技术

卡拉胶是红藻中提取的一种海洋多糖，被主要用于藻胶产业，其具有较高的生物活性，如抗凝、抗病毒、降低胆固醇和抗氧化等作用，但多糖的溶解性不好，较难吸收，使其在生物医药领域应用上受到限制。目前降解多糖的方法主要有物理降解、化学降解和生物降解法。化学降解和物理降解均为随机降解，所得寡糖的分子片段不均一。微生物能够产生具有独特生理活性的酶系，迄今为止，已发现大量可以产生卡拉胶降解酶的微生物，以酶法制备的寡糖，产物均一且硫酸基团未被破坏，分子量相对较小，溶解度提高，易于吸收，且操作简单易行，稳定性好等。

我国海参有140余种，约20种可以食用，其中以分布于黄、渤海域的海参食用价值最大，品质最好。近年来由于需求的增加导致海参过度捕捞，海参的人工养殖业随之兴起，但人工养殖环境、种质退化等因素使海参感染病害的几率增大。在疾病防治过程中抗生素的使用，产生了新的致病菌，从而导致肠道菌群的紊乱产生耐药性等等。抗生素的诸多副作用使人们开始寻找新的代替物，应用天然活性成分代替抗生素是抑制病原微生物生长的一个有效途径。

近年来的研究显示，卡拉胶寡糖具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抗病毒、抑制血管生成等多种生物活性。但尚未有关于利用酶法制备具有促生长和抗逆性作用的卡拉胶寡糖及其应用的报道。

发明内容

为解决上述问题，本发明的第一个目的是提供一种具有促进海参生长和抗逆作用的卡拉胶寡糖的制备方法及其本身。本发明的另一个目的是提供利用上述卡拉胶寡糖在饲料添加剂中的应用。

本发明的技术方案如下：具有促进海参生长和抗逆作用的卡拉胶寡糖的制备方法，包括以下步骤：

(1)粗酶液的制备

将卡拉胶寡糖降解菌(Cellulophaga lytica：M9)接种到液体培养基中，震荡培养16-20h后以2％接种量进行传代，于35℃气浴摇床上震荡培养，转速120r/min，待菌株稳定后，取发酵液于4℃条件下4000r/min离心20min，取上清液即为粗酶液；

(2)卡拉胶寡糖的制备

将浓度为0.5％的卡拉胶与粗酶液和蒸馏水按照体积比为2:1:1混合，于35℃气浴摇床上震荡，降解36-48h，降解卡拉胶寡糖溶解在溶液中，经透析、干燥获得卡拉胶寡糖粉末。

优选的，所述的步骤(1)中液体培养基为(w/v)：k-卡拉胶0.1％，蛋白胨0.4％，硫酸亚铁0.001％，陈海水适量。

所述的卡拉胶寡糖降解菌，该菌株保藏号为：CGMCC No:10829。

所述的卡拉胶寡糖降解菌株M9分离自中国辽宁省大连市开发区海贝广场海域的浮游海藻样品，经生理生化及16SrDNA鉴定，该菌株分类名为Cellulophaga lytica：M9。

所述的卡拉胶寡糖降解菌株M9已于2015年6月16日提交保藏，具体保藏信息如下：

保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)；

保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；

保藏日期：2015年6月16日；