[发明专利]一种油脂氧化程度快速检测方法及测试盒

说明书

技术领域

本发明涉及油脂氧化程度的快速检测技术，具体涉及油脂氧化程度的快速检测方法及测试盒。

背景技术

油脂氧化是危及油脂安全的重要方面。受来源、存放等因素影响，油脂往往会发生氧化、酸败反应，其产生的过氧化物会渐进地影响身体组织、破坏细胞膜结构，引起贫血、肝肾异常、昏睡等问题；产生的衍生物(醛)会降低食欲引起下痢；另外蛋白质与次级氧化产物发生交联反应，降低蛋白质的消化吸收。

能够实现快速检测油脂氧化程度对于油脂的实际采购和品控有非常重要的意义。

目前快速检测油脂氧化程度的方法主要有酸价、过氧化价，Kreis试验(克雷斯试验)。

酸价虽测定容易，但通常不能单纯评价油脂品质，须配合其他方法鉴定。油脂酸价的提高，部分由于油脂水解而生成游离脂肪酸，部分由于过氧化物的分解所产生羟基化合物再氧化而生游离脂肪酸，因此游离脂肪酸生成结构随条件而异，不易做为油脂氧化程度的判断指标。

羰氧化物系在油脂氧化过程中生成，过氧化价可做氧化程度判断，但过氧化物在水中的存在或高湿下易分解，因此油脂氧化至某一程度后，过氧化价反而会降低。因此，过氧化价应为所存在过氧化物量与分解量之差，故需配合其他氧化测定方法，以利于品质的正确判断。

Kreis试验，此为醛类及酮类化合物的呈色反应，用作油脂是否氧化变质的定性反应，方便简单，使用成本低，结果快速，在国内外一度曾成为商业、卫生监督部门最初用于评价脂肪氧化的一种重要的检验方法。但Kreis试验的最大缺点是无法定量，造成该原因的一个重要因素是，各个实验室之间很难得到一致的检验结果，不同的人员操作，或同一人员两次操作所的颜色可能会有差异，故而迄今只作为定性方法使用，故而迄今多用于定性。

发明专利《快速检测油脂氧化程度的方法及测试盒》(公开号104048960A)中通过加入1,1,3,3-四乙氧基丙烷来实现油脂氧化程度(以丙二醛含量计)的定量检测，但在该方法中沿用了Kreis试验的传统操作方法，存在稳定性及重复性差，显色时间长，油层显色层分离较慢等缺陷。

为了克服上述现有技术的不足，本发明提供一种基于Kreis试验，稳定、快速、可定量的油脂氧化程度快速检测方法，及配合该检测方法制备的油脂氧化程度快速检测测试盒。

发明内容

为了实现快速、便捷、低成本，且可稳定定量地检测油脂氧化程度，本发明提供一种油脂氧化程度的快速检测方法及测试盒。

本发明基于Kreis试验方法，原理为油脂氧化二次分解产物与间苯三酚发生显色反应。通用方法为：取试样5mL于试管中，加入浓盐酸5mL，用橡皮塞塞好管口，剧烈振荡10s左右，再加0.1％间苯三酚乙醇溶液5mL，加塞剧烈振荡10s左右，使酸层分离，观察下层溶液颜色，以判断油脂氧化程度。

经实际操作发现该方法：

1、试管所显颜色的深浅，不稳定：不但随操作人员的不同而变化，同一操作人员，多次操作所显颜色也有明显差异；

2、显色时间有出入：从数秒钟到数小时，很多油样所显颜色会随放置时间的延长，颜色加深；

3、不易分层，影响观察：很多油样，在震荡后，需要很长时间的静置分层，否则不利于颜色的观察和比对，特别是油样颜色较深的样品，严重影响比色效果。

针对上述问题，发明人做了大量的实验研究，发现通过调整酸溶液及间苯三酚溶液的加入比例，可大大提高该反应的速度和显色稳定性，针对市场所购油样的测试发现，溶液分层速度大大提高，大约10分钟即可彻底完成显色，不同技术人员进行试验操作，显色结果无明显差异，通过调整间苯三酚溶液溶剂的种类，如采用甲醇，分层速度再次提高，很快得到澄清透明的比色层，便于观察；调整后，可大大降低所用酸溶液的浓度，操作更为安全。

本发明采用两种比色方案：一种是比色层在上层，即通过在原有标准操作方法的基础上，减少强酸溶液的用量，使油相在比色层的下方；另一种是在上述基础上再加入适量的水或水溶液，混合后，使油相再度返回上层，对下层进行比色。两种方案各有特色，可根据待测油样的试剂情况选择，以达到最佳显色效果(不同氧化程度所显颜色的色阶明显，所得溶液更为澄清透明，减少油样本身颜色影响等)。

(一)油脂氧化程度快速检测方法具体方案如下：

1.比色相在上层的检测方法：

取待测油样，依次加入强酸溶液，间苯三酚的醇溶液，振摇，显色稳定后比色，其中，加入的强酸溶液与间苯三酚的醇溶液的体积比为1:(1.5-50)，比色时观察上层相颜色。