[发明专利]一种利用茶果壳制备木糖醇的方法在审
申请号: | 201510488115.4 | 申请日: | 2015-08-11 |
公开(公告)号: | CN104975047A | 公开(公告)日: | 2015-10-14 |
发明(设计)人: | 曹秀玲;宁发子;宁成勇 | 申请(专利权)人: | 重庆都好生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P7/18 | 分类号: | C12P7/18;C12R1/72 |
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地址: | 402260 重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 果壳 制备 木糖醇 方法 | ||
1.一种利用茶果壳制备木糖醇的方法,其特征在于,所述方法按如下步骤进行:
(1) 水解:将原料茶果壳洗净,烘干后破碎,置于水解釜中,加入原料茶果壳质量3~4倍的水,煮沸90 ~ 120min,排水后再加入原料茶果壳质量5 ~ 6 倍的0.5wt%~ 1wt%硫酸,即0.5wt%~ 1wt%硫酸水溶液,在120 ~ 130℃,0.1 ~ 0.15MPa 的条件下水解3 ~ 5h,得到水解液;
(2) 中和:将步骤(1) 所得水解液升温至75 ~ 80℃,边搅拌边加入CaCO3乳液进行中和,中和至pH 为3.5 ~ 4.0 后,保温60 ~ 80min,过滤除渣,得到糖液;
(3) 脱色:将步骤(2) 所得糖液减压浓缩至所述糖液体积的1/5 ~ 1/7 倍,滤除析出的固体,升温至75 ~ 80℃,pH 调为2.5 ~ 3.5,边搅拌边加入活性炭A 进行脱色,脱色后滤除活性炭,得到脱色后的糖液;
(4) 离子交换:对步骤(3) 所得脱色后的糖液进行离子交换,采用732 型强酸性阳离子树脂和D201 型强碱多孔阴离子树脂进行交叉处理,所述交叉处理的方法为:先用所述阳离子树脂对脱色后的糖液进行离子交换,再用所述阴离子树脂进行离子交换,以此为一个周期,重复进行1 ~ 3 次,得到离子交换后的糖液;
(5) 发酵:首先配制培养基:将步骤(4) 所得离子交换后的糖液、酵母提取物、牛肉膏、蛋白胨、水混合即得到培养基,接入以热带假丝酵母Candida tripicalis,保藏号:AS2.1776 为出发菌株制得的酶源,在200 ~ 220r/min,28 ~ 32℃的条件下发酵48 ~ 52h,得到发酵液,然后将所得发酵液在8000 ~ 10000rpm 下离心20 ~ 25 分钟,取上清液,纯化得抽提液冷却后析出晶体,过滤收集晶体并干燥,得到产物木糖醇;所述培养基中,所述糖液中的木糖的终浓度为120 ~ 150g/L,所述酵母提取物、牛肉膏、蛋白胨的终浓度分别为8 ~
12g/L,溶剂为水,初始pH 为5.0 ~ 6.0。
2.如权利要求1 所述的制备木糖醇的方法,其特征在于,步骤(1) 中,将所述茶果壳烘干后破碎至粒度为3 ~ 5mm。
3.如权利要求1 所述的制备木糖醇的方法,其特征在于,步骤(2) 中,所述CaCO 3乳液波美度为15 ~ 17 度。
4.如权利要求1 所述的制备木糖醇的方法,其特征在于,步骤(3) 中,所述活性炭的质量用量为所述糖液质量的8%~ 12%。
5.如权利要求1 所述的制备木糖醇的方法,其特征在于所述的步骤(5) 纯化方法为:所述上清液,加入活性炭B,调节pH 至4.8 ~ 5.2,煮沸,冷却至室温,抽滤,取滤液在50 ~55℃下减压蒸干得到固体物质,并在50 ~ 55℃下用无水乙醇抽提得抽提液;所述活性炭B的质量用量以所述上清液的体积计为18 ~ 25g/L。
6.如权利要求1 所述的制备木糖醇的方法,其特征在于,步骤(5) 中,所述的酶源为所述的热带假丝酵母种子液,所述热带假丝酵母种子液的接种体积量是所述培养基体积的5%~ 15%,所述的热带假丝酵母种子液按如下方法制得:
(1) 斜面培养:将热带假丝酵母菌Candida tripicalis,保藏号:AS2.1776 接种至斜面培养基,30℃培养3 ~ 4 天,获得斜面菌体,所述斜面培养基终浓度组成为:酵母膏1.5 ~5g/L,蛋白胨2 ~ 5g/L,琼脂粉18 ~ 25g/L,木糖30 ~ 50g/L,pH 5 ~ 6,溶剂为水;
(2) 种子培养:从斜面菌体挑选一环菌体接种至种子培养基中,30℃、200rpm 培养24h,获得种子液;所述种子培养基终浓度组成为:葡萄糖5 ~ 15g/L,D- 木糖5 ~ 15g/L,酵母膏1.5 ~ 5g/L,蛋白胨2 ~ 5g/L,麦芽汁2 ~ 5g/L,pH 5 ~ 6,溶剂为水。
7.如权利要求6 所述的制备木糖醇的方法,其特征在于,所述的热带假丝酵母种子液按如下方法制得:
(1) 斜面培养:将热带假丝酵母菌AS2.1776 接种至斜面培养基,30℃培养3 ~ 4 天,获得斜面菌体,所述斜面培养基终浓度组成为:酵母膏2g/L,蛋白胨3g/L,琼脂粉20g/L,木糖40g/L,溶剂为水,pH 5.5 ;
(2) 种子培养:从斜面菌体挑选一环菌体接种至种子培养基中,30℃、200rpm 培养24h,获得种子液;所述种子培养基终浓度组成为:葡萄糖10g/L,D- 木糖10g/L,酵母膏2.0g/L,蛋白胨3.0g/L,麦芽汁3.0g/L,pH 5.5,溶剂为水。
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