[发明专利]一种利用橡胶草叶片再生植株的方法

权利要求书

1.一种利用橡胶草叶片再生植株的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)将预处理后的橡胶草叶片接种到愈伤诱导培养基中进行培养，至诱导出愈伤组织，所述愈伤诱导培养基的组成包括：MS+1.8～2.2mg/L 6-BA+0.4～0.6mg/L NAA或IAA；

2)将所述愈伤组织转移到继代培养基中进行培养，得到大量生长状况良好的愈伤组织，所述继代培养基的物质组成包括：MS+1.3～1.7mg/L 6-BA+0.1～0.3mg/L NAA或IAA；

3)将所述生长状况良好的愈伤组织接种到不定芽培养基上进行培养，至长出不定芽，所述不定芽培养基的物质组成包括：MS+0.8～1.2mg/L 6-BA；

4)将所述不定芽转接至生根培养基中诱导生根，所述生根培养基的组成包括：1/2MS+0.3～0.5mg/L NAA或IAA；

5)将生根后的苗在室温下炼苗后，移至培养基质中培养，得到橡胶草再生植株。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述愈伤诱导培养中和继代培养中的培养条件为：培养温度为23±2℃，光照强度为2000-2500Lux，每天光照12小时。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述不定芽诱导过程中和生根培养过程中的培养条件为：培养温度为23±2℃，光照强度为2500-3000Lux，每天光照16小时。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，对所述橡胶草的叶片进行预处理的步骤为：取幼嫩的橡胶草叶片，用自来水将表面清洗干净，将所述叶片浸入70％酒精中，表面消毒1～2min，然后用无菌水洗2-3遍，之后浸于15％的双氧水中表面消毒6～8min，最后用无菌水冲洗5-6遍，然后将表面的水吸干。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤5)中，具体操作为：根长至8-10cm时，将橡胶草幼苗移至室温炼苗3～5天；然后将所述幼苗移栽至泥炭土、蛭石的混合培养基质中，并在80％～95％的空气湿度和25±2℃的环境中对橡胶草培养两周；最后移至正常的光照和温度条件下进行培养。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述愈伤诱导培养基中还包括蔗糖25～35g/L，琼脂6～8g/L；所述继代培养基中还包括蔗糖25～30g/L，琼脂6～7g/L；所述不定芽诱导培养基中还包括蔗糖15～25g/L，琼脂5～7g/L；所述生根培养基中还包括蔗糖10～20g/L，琼脂5～7g/L；所述培养基的pH均为6.0～7.0。