[发明专利]一种粘液处理液及用途

说明书

技术领域

本发明涉及细胞生物技术领域，尤其涉及一种粘液处理液及用途。

背景技术

临床上取宫颈细胞样品或者痰液细胞时，样品上常携带有大量的粘液，粘液会包裹细胞，影响细胞在玻片上的平铺效果，粘液附着在玻片上，造成背景复杂，可判读的细胞有限，影响结果的准确性。针对此问题，目前临床采用的解决方法有四种：1、采用过滤网过滤，将大块粘液挡在过滤网上，减少粘液附着在玻片上的面积，该方法主要缺点在于大粘液去除了，小的粘液依然会影响制片，而且会将粘液块直接过滤掉，包裹的大量细胞也随之被过滤掉。在痰液液基中，主要细胞都包裹在粘液中，无法过滤，因此本方法比较粗糙，而且不适用于痰液液基；2、采用梯度离心将大部分粘液分离掉。该方法比过滤法更彻底，能非常有效的去除粘液和杂质，但是缺点也跟第一种一样，包裹在粘液中的细胞无法分离出来，且不适用于痰液液基；3、采用二硫苏糖醇裂解，在保存液中直接加入或在细胞制片前加入二硫苏糖醇以达到裂解粘液的效果。该方法的缺点是二硫苏糖醇不稳定，易分解，需要避光，在溶液中也不稳定，容易失效，同时二硫苏糖醇有毒，会影响操作者的健康；4、采用分解肽裂解。比如采用一些动物中提取的肽蛋白，酶之类，分解效果很好，但同样有保存的局限性，而且肽和酶的反应都有温度限制，不能控制分解进度，分解过久，细胞膜也随之被分解；同时酶在含有醇类的保存液液中容易变性也是一大难题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高效、无毒、专一且成本低的粘液处理液。

为实现上述目的，本发明提供一种粘液处理液，其特征在于：由氯化钠、Tris缓冲液、分散剂、表面活性剂、粘液分解试剂和双蒸水组成。

进一步，所述氯化钠含量为5-9g/L、Tris缓冲液0.01-0.1M，分散剂含量为0.1-3g/L，表面活性剂含量为体积分数0.1%-0.3%，粘液分解试剂1-5g/L，其余为双蒸水。

进一步，所述氯化钠含量为8-9g/L、Tris缓冲液0.01-0.05M，分散剂含量为1-3g/L，表面活性剂含量为0.5-2g/L，粘液分解试剂3-5g/L，其余为双蒸水。

进一步，所述分散剂为乙二胺四乙酸二钠。

进一步，所述表面活性剂为tritonX-100。

进一步，所述粘液分解试剂为甲基半胱氨酸。

本发明还保护所述粘液处理液用于含有大量粘液的样品预处理的用途。

进一步，所述粘液处理液的加量为10mL细胞样品添加200ul权利要求1-5任一项所述粘液处理液。

本发明还保护所述粘液处理液来处理含有大量粘液的样品的方法，其特征在于，其步骤为：向含有粘液的细胞保存液10mL里加入200ul权利要求1-5任一项所述处理液，混匀静置5分钟后即可将细胞样品过滤，然后制片染色，镜检观察。

本发明所述表面活性剂为TritonX-100，合适的表面活性剂量能起到溶解粘液的作用，又能清除污垢，增加溶液的溶解度。低于下限，效果不佳；高于上限会导致正常细胞的裂解。

所述缓冲体系为Tris，能溶解部分粘液，且处理液整体呈弱碱性，缓冲范围广，能维持多个取材部位的细胞正常形状。

所述分散剂为乙二胺四乙酸二钠，能分散细胞之间的粘连。低于下限，效果不佳；高于上限会导致细胞破裂。

所述粘液分解剂选用甲基半胱氨酸，该化学试剂在酸碱条件下均有效，高效，短时间内裂解粘液，对细胞损伤小。低于下限，效果不佳；高于上限会导致细胞膜破裂。

本发明的粘液处理液的有益效果是：

1，所述配方提供了一种稳定的粘液处理液，常温下可放置贮存，不易变质，而酶类则要求比较严格，一般要在冷藏环境下贮存，二硫苏糖醇及其衍生物在溶液中则易降解，不适合长期保存；

2，本发明在溶液里能兼容于酸性或碱溶液，酶类则要求特定PH下方可发挥活性；

3，所述配方提供了一种无毒，专一，高效的粘液处理液，所述配方的原料无毒，对粘液裂解迅速，对细胞则比较温和，因此不会因为粘液降解过程而损害细胞。二硫苏糖醇刺激性大，对操作者是个不利的因素，酶类反应迅速，不易控制，很容易将细胞也裂解，导致损失细胞。

附图说明

图1是本发明实施例6的样品处理，没有用粘液处理情况下的镜检图片，10X；

图2是本发明实施例6的样品处理，用本发明处理液处理后的镜检图片，10X；

图3是本发明实施例6的样品处理，用市售的含有酶的保存液处理后的镜检图片，10X；