[发明专利]环二核苷酸cGAMP联合PD1的抗体（Nivolumab）在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种环二核苷酸（cGAMP）联合Nivolumab在抗肿瘤中以及在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

肿瘤，目前是一类严重危害人类生命健康的重大疾病，其具体表现为细胞过度增殖和分化异常，且难以抑制。据WHO专家预测，到2020年，全球人口的肿瘤发病人数将达到2000万人，死亡人数将达到1200万人，因此，肿瘤将成为本世纪人类第一大杀手，对人类生存构成最严重的威胁。在中国，包括肺癌、结直肠癌、胃癌、肝癌等的发病率和死亡率均居各类恶性肿瘤的前列，据全国肿瘤登记中心发布的(2012中国肿瘤登记年报》统计，每年新发生肿瘤病例约为312万例，平均每天8 550人，全国每分钟有6人被诊断为癌症。从病种来看，肺癌、胃癌、结/直肠癌、肝癌和食管癌，居全国恶性肿瘤发病的前五位。随着恶性肿瘤发病率和死亡率的逐年增加，恶性肿瘤治疗需求越来越大。特别是随着中国人口的老龄化、淡水食品污染、环境污染等，中国恶性肿瘤患者人数将继续增加。

目前，化疗是治疗肿瘤的常用有效方法之一。传统化疗药物的作用机制主要是阻止脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)或蛋白质的合成，或直接对这些大分子发生作用，从而抑制肿瘤细胞的分裂增殖，使之死亡。有些药物也可以通过改变体内激素平衡而抑制肿瘤生长。目前抗肿瘤药物已发展到6大类：①抗代谢药；② 烷化剂；③ 细胞毒素类抗生素；④ 植物生物碱和其他天然药；⑤抗肿瘤激素类；⑥ 铂类及其他抗肿瘤药。随着临床治疗模式的转变和一些新的抗肿瘤药物靶点的发现，抗肿瘤药物领域的研发发生了巨大变化：就药物的作用机制而言，从传统的非特异性的细胞毒类药物转向了非细胞毒类的靶向药物开发。2012年FDA批准的抗肿瘤药物中，小分子酪氨酸激酶抑制剂(TKI)成为研发最热门的一类抗肿瘤药物，尤其是作用于多个靶点的TKI(约占3／4)，截至2013年6月美国FDA批准的TKI已达18种。此外，其他热点作用机制药物包括免疫刺激剂、血管生成抑制剂、细胞周期抑制剂、免疫抑制剂和刺激剂、蛋白激酶抑制剂等。近年来，越来越多免疫调节剂用于临床，并用于肿瘤治疗。

在感染的哺乳动物细胞中微生物和病毒DNA能通过刺激干扰素分泌诱导內源强有力的免疫应答。内质网（ER）受体蛋白（STING）对胞质DNA的免疫应答是必需的因素。最近的研究表明，环化cGMP-AMP二核苷酸合成酶（cGAS）在结合DNA后的活化条件下，内源性地催化cGAMP的合成。cGAMP是一种胞质DNA传感器，它作为第二信使通过STING刺激INF-β的感应，介导TBK1和IRF-3的活化，进而启动INF-β基因的转录。最近报道，重组cGAS在DNA结合条件下催化环化cGMP-AMP二核苷酸GAMP。cGAS结合18bp dsDNA的复合物的晶体结构也已被报道，cGAMP在抗病毒免疫方面的研究已被证实。cGAMP结合STING，使转录因子IRF3激活并产生β干扰素。通过STING通路，cGAMP可被作为免疫调节剂，用于激活免疫系统抗肿瘤。

Nivolumab是百时美-施贵宝公司开发的PD1抗体，并在2014年获得FDA批准上市，目前已经应用于治疗黑色素瘤和乳腺癌。PD1是细胞表面的受体，PD1与PDL1结合后，能够抑制T细胞的活化，从而下调人体免疫反应过程，促使肿瘤细胞逃脱免疫T细胞的识别。Nivolumab能够结合PD1，阻断PD1与PDL1结合，并促使效应T细胞活化，从而杀伤肿瘤细胞，通过该免疫途径，治疗恶性肿瘤。目前，Nivolumab抗体被FDA授予突破性治疗药物，该PD1抗体已开始单独或者联合其它抗体（如CTLA4抗体）等，用于临床上治疗多种癌症。

目前，尚没有文献报道将环二核苷酸cGAMP和PD1-PDL1相互作用抑制性抗体联合使用治疗肿瘤的相关报道。

发明内容

本发明的目的在于提供cGAMP联合Nivolumab在抗肿瘤中的应用。本发明实验研究表明，cGAMP联合Nivolumab可以显著抑制多种肿瘤细胞的生长，具有明显的抗肿瘤作用，可用于制备抗肿瘤药物。本发明中，所述肿瘤包括但不限于腺癌、肺癌、结肠癌、乳腺癌、黑色素瘤等。

具体实施方式

下面通过实施例具体说明本发明的内容。在本发明中，以下所述的实施例是为了更好地阐述本发明，并不是用来限制本发明的范围。

实施例1：cGAMP 的制备