[发明专利]一种基于磁微粒子的光学微流控芯片进行病原检测的方法

权利要求书

1.一种基于磁微粒子的光学微流控芯片进行病原检测的方法，该基于磁微粒子的光学微流控芯片具有至少一反应池，该反应池的顶盖内侧预固定抗体-磁粒子，底侧通过印章压印或者微纳点样预固定配对的特异识别单抗或者多抗；其特征在于，该方法包括：

待测样品中的待测物与反应池中的抗体-纳米磁粒子进行结合反应，并进一步在变换磁场的作用下，抗体-磁粒子在反应池中上下运动，增加抗体-磁粒子与样品中待测物的接触，提高反应结合速度，减少反应时间。

2.根据权利要求1所述的基于磁微粒子的光学微流控芯片进行病原检测的方法，其特征在于，该方法通过转换磁场的方向，进一步将多余的磁粒子吸附至反应池顶盖内侧，而与待测物结合的磁粒子则通过配对抗体结合作用固定在反应池底侧，待测物的浓度与最终被固定在反应池底侧的纳米磁粒子密度成正比。

3.根据权利要求1所述的基于磁微粒子的光学微流控芯片进行病原检测的方法，其特征在于，所述反应池的顶盖内侧预固定抗体-磁粒子，是通过以下方式实现的：

抗体-磁粒子固定在反应池顶盖内侧，通过滴加或涂敷方式固定，功能化磁粒子的滴加量：0.1～1微升；抗体-磁粒子悬浮液采用50g/Lsucrose、50g/LBSA或PBS，浓度为10g/L。

4.根据权利要求1或3所述的基于磁微粒子的光学微流控芯片进行病原检测的方法，其特征在于，所述抗体-磁粒子采用磁微纳粒子，粒径范围在200nm～2000nm。

5.根据权利要求1所述的基于磁微粒子的光学微流控芯片进行病原检测的方法，其特征在于，所述底侧通过印章压印或者微纳点样预固定配对的特异识别单抗或者多抗，是通过以下方式实现的：

单抗2固定在反应池底侧，通过滴涂方式固定，或通过微米印章来印制固定。

6.根据权利要求1所述的基于磁微粒子的光学微流控芯片进行病原检测的方法，其特征在于，所述反应池是圆形或多边形，宽度尺寸范围在1～5毫米之间，深度范围在50～500微米之间。

7.根据权利要求1所述的基于磁微粒子的光学微流控芯片进行病原检测的方法，其特征在于，所述反应池同时也是样品富集区和检测区，反应池顶盖内侧预固定单克隆抗体-磁粒子，而底侧预固定另一种抗原特异识别单抗或者多抗；待测样品中的待测物与反应池中的抗体-纳米磁粒子进行结合反应，并进一步在变换磁场的作用下，抗体-磁粒子在反应池中上下运动，增加了抗体-磁粒子与待测样品中待测物质的接触，提高了反应结合速度，大大减少了反应时间；通过转换磁场可以将多余的磁粒子吸附至反应池顶盖内侧，而与待测物结合的磁粒子则通过二抗结合作用固定在反应池底侧，待测物的浓度与最终被固定在反应池底侧的纳米磁粒子密度成正比；通过光学检测装置进行FTIR光学检测，并进行浓度校正计算，从而得到待测物质的浓度。

8.根据权利要求7所述的基于磁微粒子的光学微流控芯片进行病原检测的方法，其特征在于，所述光学检测装置至少为发光二极管、光电倍增管或CCD。

9.根据权利要求1或7所述的基于磁微粒子的光学微流控芯片进行病原检测的方法，其特征在于，作用于所述反应池的变换磁场，采用电磁场驱动的位于反应池上方和下方的两个小电磁铁来实现，交替给予上下两个线圈电控制，实现磁场的快速变化，从而驱动磁粒子在反应池中上下运动，加快反应速度；最终，上磁场驱动进行未反应磁粒子上浮，反应磁粒子吸附在反应池底侧，实现磁作用下样品分离。

10.根据权利要求9所述的基于磁微粒子的光学微流控芯片进行病原检测的方法，其特征在于，所述变换磁场采用直径1～10mm，高度2～10mm的微磁铁实现，或者通过电磁阀控制的两个永磁铁来实现，将电磁阀控制的两个永磁铁分别置于反应池上下两侧，通过电磁阀控制实现靠近和离开反应池，实现磁粒子的上下扰动，从而实现磁富集和磁分离。