[发明专利]人类免疫缺陷病毒HIV‑1的定量检测试剂盒

权利要求书

1.一种人类免疫缺陷病毒HIV-1的定量检测试剂盒，其特征在于，包括：

样本处理剂，包括异硫氰酸胍、柠檬酸钠、十二烷基肌酸钠、β-巯基乙醇和蛋白酶K；

用于靶核苷酸扩增的上游引物HIV-F；

用于靶核苷酸扩增的下游引物HIV-R；

用于靶核苷酸检测的Taqman探针HIV-P，所述Taqman探针HIV-P的两端分别结合有荧光基团和荧光猝灭剂；以及

RNA一步法反应缓冲液；

所述样本处理剂用于与检测样本混合均匀后在55℃～70℃加热10min～15min；

所述检测样本为未经过提取核酸分子处理的样本；

所述样本处理剂中，所述异硫氰酸胍的浓度为0.2mol/L～2mol/L，所述柠檬酸钠的浓度为10mmol/L～30mmol/L，所述十二烷基肌酸钠的质量百分含量为0.2％～1％，所述β-巯基乙醇的浓度为0.05mol/L～0.1mol/L，所述蛋白酶K的浓度为1mg/mL～5mg/mL；

所述上游引物HIV-F的序列为SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示的序列，所述下游引物HIV-R的序列为SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5或SEQ ID No.6所示的序列；

所述Taqman探针HIV-P的序列为SEQ ID No.7或SEQ ID No.8所示的序列。

2.根据权利要求1所述的人类免疫缺陷病毒HIV-1的定量检测试剂盒，其特征在于，所述Taqman探针HIV-P的5’端结合有FAM，所述Taqman探针HIV-P的3’端结合有BHQ1。

3.根据权利要求1所述的人类免疫缺陷病毒HIV-1的定量检测试剂盒，其特征在于，还包括HIV-1内标的RNA转录物和内标探针HIV-IC，所述HIV-1内标的RNA转录物为HIV-1内标转录得到，所述HIV-1内标为竞争性内标，所述内标探针HIV-IC的两端分别结合有荧光基团和荧光猝灭剂。

4.根据权利要求3所述的人类免疫缺陷病毒HIV-1的定量检测试剂盒，其特征在于，所述HIV-1内标的序列为SEQ ID No.9所示的序列。

5.根据权利要求3所述的人类免疫缺陷病毒HIV-1的定量检测试剂盒，其特征在于，所述内标探针HIV-IC的碱基序列序列为SEQ ID No.10所示的序列，所述内标探针HIV-IC的5’端结合有HEX，所述内标探针HIV-IC的3’端结合有BHQ1。

6.根据权利要求1所述的人类免疫缺陷病毒HIV-1的定量检测试剂盒，其特征在于，还包括HIV-1定量参考品、HIV-1阳性对照和HIV-1阴性对照。