[发明专利]一种高产γ-氨基丁酸植物乳杆菌的培养方法及应用在审
申请号: | 201510495998.1 | 申请日: | 2015-08-13 |
公开(公告)号: | CN105002118A | 公开(公告)日: | 2015-10-28 |
发明(设计)人: | 刘鹏;迟涛;方景泉 | 申请(专利权)人: | 黑龙江省乳品工业技术开发中心 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P13/00;C12R1/25 |
代理公司: | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 150028 黑龙江省哈尔*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高产 氨基 丁酸 植物 杆菌 培养 方法 应用 | ||
1.一种高产γ-氨基丁酸植物乳杆菌的培养方法,其特征在于,是将植物乳杆菌(Lb.plantarum)ATCC14917经过活化以后,按照3%的接种量,在如下的发酵体系中进行培养:培养基为MRS培养基,发酵初始pH4.0-6.8;L-谷氨酸钠浓度为0-1mol/L,磷酸吡哆醛的添加量为0-0.001mol/L,发酵温度为25-42℃,发酵时间为8-72h。
2.权利要求1所述培养方法,其特征在于,步骤如下:
1)活化植物乳杆菌ATCC1497,获得活化植物乳杆菌;
2)在MRS培养基中添加0-1mol/L的L-谷氨酸钠,0-0.001mol/L的磷酸吡哆醛,并将pH调节至pH4.0-6.8,获得发酵培养基;
3)将步骤1)所得的活化植物乳杆菌按照3%的接种量,接种到步骤2)所得的发酵培养基中,在25-42℃的发酵温度下,发酵8-72h。
3.权利要求2所述培养方法,其特征在于,步骤1)所述活化,是将植物乳杆菌ATCC14917按照2%的接种量接种到5mL MRS液体培养基中,在30℃下静置培养12h,培养结束后再将菌种接种到MRS固体培养基中在30℃下静置培养36-48h后,挑取单菌落再置于5mL液体MRS培养基中在30℃下静置培养12h,最后在以2%的接种量接种在50mL的MRS培养基中,在30℃下静置培养12h。
4.权利要求2所述培养方法,其特征在于,步骤2)所述L-谷氨酸钠添加量为0.375-0.75mol/L;所述磷酸吡哆醛含量为0.0001-0.0007mol/L。
5.权利要求4所述培养方法,其特征在于,步骤2)所述L-谷氨酸钠添加量为0.5mol/L;所述磷酸吡哆醛含量为0.0005mol/L。
6.权利要求2所述培养方法,其特征在于,步骤2)所述发酵初始pH5.0-6.0,发酵温度为35-40℃,发酵时间为24-48h。
7.权利要求6所述培养方法,其特征在于,步骤2)所述发酵初始pH5.5,发酵温度37℃,发酵时间为36h。
8.权利要求2所述培养方法,其特征在于,所述MRS培养基,培养基体积为2L。
9.权利要求2所述培养方法,其特征在于,具体步骤如下:
1)将植物乳杆菌ATCC14917按照2%的接种量接种到5mL MRS液体培养基中,在30℃下静置培养12h,培养结束后再将菌种接种到MRS固体培养基中在30℃下静置培养36-48h后,挑取单菌落再置于5mL液体MRS培养基中在30℃下静置培养12h,最后在以2%的接种量接种在50mL的MRS培养基中,在30℃下静置培养12h,培养结束后获得活化植物乳杆菌;
2)在MRS培养基中添加至终浓度为0.5mol/L的L-谷氨酸钠和0.0005mol/L的磷酸吡哆醛,并将pH调节至5.5,获得发酵培养基;
3)将步骤1)所得的活化植物乳杆菌按照3%的接种量将步骤1)所得的活化植物乳杆菌按照3%的接种量,在37℃下发酵36h。
10.权利要求1-9所述任一培养方法,其特征在于,用于生产γ-氨基丁酸。
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