[发明专利]一种多菌种两步联合发酵饲料的方法

权利要求书

1.一种多菌种两步联合发酵饲料的方法，其特征在于，主要包括以下步骤：

(1)活化菌种，并分别制备根霉、米曲霉、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、啤酒酵母的纯培养物；

(2)发酵原料预处理，包括将原料粉碎、拌水混匀后灭菌；

(3)好氧发酵：接种根霉、米曲霉、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、啤酒酵母的纯培养物到发酵原料中，接种后拌匀，置于28～30℃保湿好氧培养36～48h，温度升高后置于37℃恒温培养箱通风培养24h，控制相对湿度85％～95％；

(4)厌氧发酵：好氧阶段结束后，打散、拌匀发酵饲料，装入单向排气密封袋，置于室温下厌氧培养4～8d；

所述步骤(2)发酵原料预处理包括：①发酵原料的粉碎：按质量比取玉米10～15份，麸皮10～15份，豆粕15～25份，棕榈粕35～45份，次粉10～15份，尿素1～2份，葡萄糖0.5～1份，混匀、粉碎，过筛，细度为20～40目；②发酵原料的拌水，料水比为1:0.6～1.0，拌匀，装盘；③发酵原料的灭菌：对发酵原料进行高压蒸汽灭菌，灭菌的条件是0.1Mpa～0.2Mpa，15～30min；

所述步骤(3)中的菌种按质量比例接种，每100份灭菌后物料，接种根霉菌麸皮种子纯培养物0.2～0.7份，米曲霉麸皮种子纯培养物0.2～0.7份，枯草芽孢杆菌纯培养物0.8～1.2份，植物乳杆菌纯培养物0.5～1.5份，啤酒酵母纯培养物2～8份。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，每100份灭菌后物料，接种根霉菌麸皮种子纯培养物0.2～0.7份，米曲霉麸皮种子纯培养物0.2～0.7份，枯草芽孢杆菌纯培养物的接种量为1份，植物乳杆菌纯培养物的接种量为1份，啤酒酵母纯培养物的接种量为6份。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，根霉种子纯培养物的制备：接种活化后的根霉菌丝体到豆粕麸皮培养基固体培养基上，28～30℃恒温培养3～5d。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，米曲霉种子纯培养物 的制备：接种活化后的米曲霉菌丝体到豆粕麸皮培养基固体培养基上，28～30℃恒温培养3～5d。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，枯草芽孢杆菌种子纯培养物 的制备：接种斜面活化后的枯草芽孢杆菌至50ml LB种子培养液，37℃恒温振荡培养10～18h。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，植物乳杆菌种子纯培养物 的制备：转接1ml～2ml活化后的植物乳杆菌液体培养液至50ml MRS种子培养液，37℃静置培养10～18h。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，啤酒酵母种子纯培养物 的制备：转接1ml～2ml活化后的啤酒酵母液体培养液至50ml YPD种子培养液，28～30℃静置培养12～18h。

8.根据权利要求1-7任一所述方法制备得到的饲料。