[发明专利]复方石淋通制剂的多指标成分同时测定方法及指纹图谱构建方法

说明书

技术领域

本发明一种复方石淋通制剂的多指标成分同时测定方法，以及复方石淋通制剂指纹图谱的构建方法。

背景技术

复方石淋通中药方包括广金钱草、石韦、海金沙、滑石粉、忍冬藤五味药材。该方具有清热利湿，通淋排石功效，可用于膀胱湿热，石淋涩痛，尿路结石，泌尿系感染属肝胆膀胱湿热者。此外，还有文献报道其对泌尿系统感染常见的细菌具有不同程度的抑制作用；能明显防治乙二醇、氯化铵诱发的肾结石形成，有明显的利尿作用及抗炎作用；并有显著的镇痛作用。

现有技术中，根据复方石淋通中药方，已制得多种剂型复方石淋通制剂。通常的制备工艺一般为：分别将四味药材（除滑石粉外）进行水提醇沉，采用真空干燥，将干膏合并混匀，并加入处方量的滑石粉和适量的辅料，即制备成片剂、颗粒剂、胶囊剂等多种剂型。

例如，复方石淋通胶囊采用中药广金钱草1500g、石韦500g、海金沙500g、滑石粉25g、忍冬藤500g，分别将四味药材（除滑石粉外）进行水提醇沉，采用真空干燥，将干膏合并混匀，并加入处方量的滑石粉和适量的辅料，混匀，95%乙醇制颗粒，干燥，装入胶囊，即得。

复方石淋通包括广金钱草、石韦、海金沙和忍冬藤，所含成分复杂多样。据文献报道，广金钱草主要成分包括黄酮类、酚酸类、生物碱类、挥发性成分和多糖等，石韦主要成分包括三萜类、黄酮类、呫酮类、挥发油和甾体等，海金沙药用部位包括全草、成熟孢子、根及根茎，目前2010版药典只收载了海金沙干燥成熟孢子为药材。海金沙全草、根及根茎中的化学成分主要包括挥发油、黄酮类、酚酸类等，对于海金沙孢子中与其功能主治相关的有效成分还不是很清楚，忍冬藤主要成分包括酚酸类、皂苷类、黄酮类、挥发油类等。

但复方石淋通胶囊现有的质量标准为国家食品药品监督管理局标准（YBZ04472009），该标准“鉴别”项采用TLC法对广金钱草进行鉴别：取复方石淋通胶囊内容物，用有机溶剂超声提取，萃取，合并乙酸乙酯层，蒸干，残渣复溶，作为供试品溶液；同法制备成对照药材溶液；供试品溶液和对照药材溶液点板于聚酰胺薄膜上，采用适宜展开剂展开，显色剂显色，进行药材鉴别。“含量测定”项采用高效液相色谱法测定指标性成分绿原酸：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.5%磷酸（11：89）为流动相；检测波长为326nm。用有机溶剂超声处理胶囊内容物，制备成供试品溶液；取绿原酸对照品制备成对照品溶液；采用外标法计算绿原酸含量。该标准未对其他有效成分进行定量检测，存在一定局限性，不能全面反映中药产品的质量水平。

指纹图谱技术是新发展的中药质量控制方法。指纹图谱能较全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，可对药物品质进行整体描述和评价。多指标成分同时测定联合指纹图谱技术是进一步发展的质量控制方法，既注重宏观特征，又监控多个有效成分的含量，可实现微观和宏观的有机结合，符合中医药整体、宏观、复杂的特点，可从整体上评价和控制中药制剂的质量，是中药现代化关键技术之一。

对于复方石淋通制剂，亟需建立检测方法，构建多指标成分同时测定方法联合指纹图谱技术，以更全面准确的监控复方石淋通制剂的质量。

发明内容

本发明的目的在于克服现有的复方石淋通制剂的质量检测方法所检测的有效成分单一，不能全面反应复方石淋通制剂质量的缺陷，而提供一种复方石淋通制剂多指标成分同时测定方法，以及复方石淋通制剂指纹图谱的构建方法。

本发明通过文献调研，确定了指纹图谱中与药效相关的主要指标成分，即绿原酸、夏佛塔苷、异夏佛塔苷，进一步经实验摸索，最终建立了一种专属性强、操作简便，且稳定性、精密度、重现性和加样回收率均良好的检测方法，从而建立了科学合理的复方石淋通制剂的多指标成分指纹图谱。

本发明的技术方案如下：

复方石淋通制剂多指标成分同时测定包括如下步骤：将复方石淋通制剂的供试品溶液进行高效液相色谱法检测，即可；所述的高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，流动相A为乙腈，流动相B为体积百分比0.1%的甲酸水溶液，含量测定洗脱梯度如表1所示，检测波长为335nm；

表1