[发明专利]一种金枪鱼鱼骨胶原蛋白源硒螯合胶原肽的制备方法

权利要求书

1.一种金枪鱼鱼骨胶原蛋白源硒螯合胶原肽的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

a）清理金枪鱼鱼骨上面的鱼肉及污物后清洗、干燥，粗粉碎至2-3cm的颗粒，将鱼骨颗粒浸入浸泡液中，温度45-55℃，浸泡时间2-4h，捞出沥干后超微粉粹至粒径10-20μm的鱼骨粉末，-10℃下保存备用；

b）将步骤a）得到的鱼骨粉末加入至1-3mol/L的柠檬酸溶液中，并加热至55-65℃，超声震荡3-5h，13000-15000r/min离心15min后取上清液，加入添加剂，静置2-4h后15000r/min离心15min得到沉淀物，沉淀物干燥后在-20℃下保存10-12h，得到鱼骨胶原蛋白；添加剂由以下重量份的原料组成：食盐6-10份、果糖5-7份、盐酸硫胺素3-5份、天冬酰胺10-15份、蛋氨酸12-15份，添加剂的加入量为鱼骨粉末质量的2-3.5倍，鱼骨粉末与柠檬酸溶液的料液比为1g：30mL；

c）向步骤b）得到的鱼骨胶原蛋白中加入去离子水，调节pH至1.3-2.3，再加入胃蛋白酶，酶解反应1-2h后灭酶活，

然后调节pH至7.5-8.5，加入胰蛋白酶，酶解反应5-6h，得到酶解产物；

d）将步骤c）得到的酶解产物采用2500Da超滤膜进行超滤处理，收集分子量小于2500Da部分，得到超滤酶解液；玻璃吸附柱中装填质量比为3:1:2的活性炭、石墨粉与纳米银，超滤酶解液以50-85mL/min的流速进行循环层析，层析次数10-20次，循环层析时在外部施加磁场，磁场的强度为0.2-1.8T；然后以12000-15000r/min离心2-4min，收集上清液，向上清液底部注射富硒酵母粉末，喷雾干燥得到金枪鱼鱼骨胶原蛋白源硒螯合胶原肽。

2.根据权利要求1所述的一种金枪鱼鱼骨胶原蛋白源硒螯合胶原肽的制备方法，其特征在于，步骤a）中浸泡液由以下重量份的原料组成：生姜45-50份、山楂20-25份、蜂巢14-26份、野菊花1-5份、茶叶30-40份、碳酸氢钠15-18份、海藻酸钠12-15份与水100-150份，鱼骨颗粒与浸泡液的质量比为1:10。

3.根据权利要求1所述的一种金枪鱼鱼骨胶原蛋白源硒螯合胶原肽的制备方法，其特征在于，步骤d）中活性炭的粒度为400目，比表面积1450㎡，石墨粉的粒径为15-25μm。

4.根据权利要求1所述的一种金枪鱼鱼骨胶原蛋白源硒螯合胶原肽的制备方法，其特征在于，胃蛋白酶的酶活力为40万U/克，胰蛋白酶的酶活力为200万U/克，胃蛋白酶的加入量为鱼骨胶原蛋白的0.3-0.8%，胰蛋白酶的加入量为鱼骨胶原蛋白的0.4-0.7%。

5.根据权利要求2所述的一种金枪鱼鱼骨胶原蛋白源硒螯合胶原肽的制备方法，其特征在于，浸泡液制备时，先将水加热至85℃，加入生姜、山楂、蜂巢、野菊花与茶叶，继续加热至水沸腾5次后降温到45-55℃，然后加入碳酸氢钠与海藻酸钠而制得。

6.根据权利要求1所述的一种金枪鱼鱼骨胶原蛋白源硒螯合胶原肽的制备方法，其特征在于，步骤b）中超声波功率为55-65kw。