[发明专利]间充质干细胞的三维动态诱导培养方法在审
申请号: | 201510502278.3 | 申请日: | 2015-08-17 |
公开(公告)号: | CN105132366A | 公开(公告)日: | 2015-12-09 |
发明(设计)人: | 曾宪卓;鲁菲 | 申请(专利权)人: | 深圳华毓造血干细胞研究有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 518057 广东省深圳市南山区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 间充质 干细胞 三维 动态 诱导 培养 方法 | ||
1.一种间充质干细胞的三维动态诱导培养方法,其特征在于,包括以下步骤:
获取间充质干细胞;
将间充质干细胞与含有磁性氧化物颗粒的可溶性的海藻酸盐混合后,再与除镁离子以外的二价金属离子盐溶液混合至形成凝胶球;
将所述凝胶球置于磁场中,并用诱导剂对所述凝胶球内的间充质干细胞进行动态诱导培养;
其中,磁性氧化物颗粒的直径为1-100nm。
2.根据权利要求1所述的间充质干细胞的三维动态诱导培养方法,其特征在于,所述凝胶球的形成过程为:将所述间充质干细胞与含有磁性氧化物颗粒的可溶性的海藻酸盐混合后,再匀速滴入除镁离子以外的二价金属离子盐溶液中。
3.根据权利要求1所述的间充质干细胞的三维动态诱导培养方法,其特征在于,所述磁性氧化物为Fe304或Co3O4。
4.根据权利要求3所述的间充质干细胞的三维动态诱导培养方法,其特征在于,所述磁性氧化物颗粒为Fe304颗粒,且所述海藻酸盐中,Fe304的浓度为2-10mg/ml。
5.根据权利要求1所述的间充质干细胞的三维动态诱导培养方法,其特征在于,所述海藻酸盐为海藻酸钙或海藻酸钠。
6.根据权利要求5所述的间充质干细胞的三维动态诱导培养方法,其特征在于,所述海藻酸盐为海藻酸钠,且与所述间充质干细胞混合后,海藻酸钠的浓度为2%-10%W/V。
7.根据权利要求1所述的间充质干细胞的三维动态诱导培养方法,其特征在于,所述二价金属离子盐溶液为氯化钙溶液,且氯化钙的浓度为1%-5%W/V。
8.根据权利要求1所述的间充质干细胞的三维动态诱导培养方法,其特征在于,所述凝胶球置于磁场之前,还包括采用培养基清洗所述凝胶球的步骤。
9.根据权利要求1所述的间充质干细胞的三维动态诱导培养方法,其特征在于,所述磁场的最大磁能积为35MGOe。
10.根据权利要求1所述的间充质干细胞的三维动态诱导培养方法,其特征在于,所述诱导剂包括5-15ng/ml的TGF-β、7-10mmol/l地塞米松、50-100ug/ml抗坏血酸、5-15mmol/l甘油磷酸钠和50-150ng/ml的ITS+Premix。
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