[发明专利]次生盐渍化土壤修复菌剂的制备方法及应用有效

专利信息
申请号: 201510505726.5 申请日: 2015-08-18
公开(公告)号: CN105154357B 公开(公告)日: 2018-06-08
发明(设计)人: 周培;王大欣;张丹;支月娥;初少华;俞明磊 申请(专利权)人: 上海交通大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N1/04;B09C1/10
代理公司: 上海交达专利事务所 31201 代理人: 王毓理;王锡麟
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 次生盐渍化土壤 保藏 菌剂 修复 保护剂 制备 硝酸盐 巨大芽孢杆菌菌株 中国微生物菌种 巨大芽孢杆菌 葡萄糖 土壤有机质 微生物中心 冻干菌剂 工艺技术 谷氨酸钠 麦芽糊精 设施蔬菜 脱脂奶粉 携带方便 有效减少 甘油 蔗糖 发酵液 甘露醇 海藻糖 山梨醇 冻干 淀粉 应用 土壤 管理
【权利要求书】:

1.一种次生盐渍化土壤修复菌剂,其特征在于,含有冻干后的巨大芽孢杆菌菌株发酵液及保护剂,其中:

所述的巨大芽孢杆菌具体为:(Bacillus megaterium)NCT-2,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.4698;

所述的保护剂采用3%的蔗糖、4%的脱脂奶粉、海藻糖中的任意一种或几种的组合,该保护剂的浓度为菌体悬浮液总质量的0.1%~8.220%;

所述的冻干条件为:冻干厚度5nm~10mm,冷阱温度为-20℃~-40℃,压力舱10Pa~30Pa。

2.一种根据权利要求1所述的土壤修复菌剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

步骤1、菌种复苏与活化:将NCT-2接种到LB固体培养基中复苏处理后,接入到无机盐培养基中,28℃~35℃培养16h~20h,得到液体发酵种子培养液;

步骤2、菌种发酵:将液体发酵种子培养液按1%~5%的接种量接入发酵罐,在28℃~35℃的环境下培养16h~24h,得到修复设施蔬菜土壤次生盐渍化菌的发酵液;

步骤3、向步骤2中得到的发酵液中加入保护剂,振荡使其混匀制得菌体悬浮液;

步骤4、将菌体悬浮液进行真空冷冻干燥12h~24h得到冻干菌剂。

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征是,所述的无机盐培养基的组分及质量百分比含量为:氯化钾0.1%~1%,七水合硫酸镁0.01%~0.7%,磷酸二氢钾0.01%~2%,硝酸钾0.1%~3%,蛋白胨0.1%~2.7%,葡萄糖0.1%~3.2%,其余为含微量铁和钙的成分,pH7.0~7.2。

4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征是,所述的冻干菌剂中菌体存活数为109~1012cfu/mL。

5.一种根据上述任一权利要求中所述的土壤修复菌剂的应用,其特征在于,具体为将该土壤修复菌剂用于修复设施蔬菜次生盐渍化土壤,具体为:将上述土壤修复菌剂按1:100~1:500的体积比加入水,以2000mL/亩的比例滴灌于待修复的土壤中,每毫升所述的巨大芽孢杆菌稀释液含菌量为2.0×108~4.5×108个;

所述的蔬菜为绿叶蔬菜类、根菜类及果菜类蔬菜;

所述的次生盐碱化土壤中硝态氮含量大于0.7g/kg。

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