[发明专利]脱细胞真皮基质及其制备方法

说明书

本发明公开了一种脱细胞真皮基质及其制备方法，脱细胞真皮基质的制备方法包括如下步骤：对哺乳动物的皮肤进行预处理后得到真皮层皮片；对真皮层皮片分别进行脱脂处理、病毒灭活处理和去除免疫原性处理，得到脱细胞真皮基质前体，去除免疫原性处理的操作为：将真皮层皮片交替浸泡在蛋白酶溶液和表面活性剂溶液中；以及对脱细胞真皮基质前体依次进行脱水、冻干和定型，得到脱细胞真皮基质。这种脱细胞真皮基质的制备方法通过将真皮层皮片交替浸泡在蛋白酶溶液和表面活性剂溶液中可以最大限度的降低真皮基质的免疫原性，又保留了真皮基质的正常胶原结构，制得的脱细胞真皮基质具有适当的降解速率、良好的生物相容性与骨诱导能力。

技术领域

本发明涉及医疗材料领域，特别是涉及一种脱细胞真皮基质及其制备方法。

背景技术

自体皮和异体皮的来源极为有限，异种(如：猪、牛等)脱细胞真皮就成为了当今软组织修复技术研究的一大主题。而真皮组织在修复过程中很容易出现一系列的免疫排斥反应，主要来自于细胞和脂肪。脱细胞真皮基质的制备方法有很多种，目的是能够去除真皮内所有的细胞成分而最大限度保留真皮内胶原结构等的完整性。

现有的专利公开了各种脱细胞真皮基质的制备方法，例如公开号为CN104288837A的专利申请公开了一种单纯利用碱液对超薄乳头层皮肤进行脱细胞的方法，但该真皮基质脱细胞方法的适用范围及应用都非常有限；公开号为CN1775189的专利申请采用哺乳动物皮肤用氢氧化钠溶液反复处理，去除组织中细胞遗传物质DNA，再用去污剂去除细胞膜中的脂类物质，但是不能有效去除细胞碎屑成分；公开号为CN201350162Y的专利公开了一种脱细胞异体真皮基质组织补片，但对其制备方法未做详述。

因此针对现有技术的不足，提供一种既能够降低真皮基质的免疫原性，又保留了真皮基质的正常胶原结构的脱细胞真皮基质及其制备方法。

发明内容

基于此，有必要提供一种大小、形状容易控制的脱细胞真皮基质及其制备方法。

一种脱细胞真皮基质的制备方法，包括如下步骤：

对哺乳动物的皮肤进行预处理后得到真皮层皮片；

对所述真皮层皮片分别进行脱脂处理、病毒灭活处理和去除免疫原性处理，得到脱细胞真皮基质前体，其中，所述脱脂处理、所述病毒灭活处理和所述去除免疫原性处理的操作顺序可以相互更换，所述脱脂处理的操作为：将所述真皮层皮片依次浸泡在质量百分含量为0.5％～3％的碱溶液及有机溶剂中进行脱脂，所述去除免疫原性处理的操作为：将所述真皮层皮片交替浸泡在蛋白酶溶液和表面活性剂溶液中；以及

对所述脱细胞真皮基质前体依次进行脱水、冻干和定型，得到脱细胞真皮基质。

在一个实施例中，所述对哺乳动物的皮肤进行预处理后得到真皮层皮片的操作为：用机械法对所述哺乳动物的皮肤进行初步脱脂及除毛，接着用取皮机将所述哺乳动物的皮肤去掉0.15mm～0.4mm表皮与皮下组织后制成厚度为0.3mm～1.0mm的真皮层皮片。

在一个实施例中，所述哺乳动物的皮肤包括依次层叠的皮毛、表皮层、真皮层和皮下组织。

在一个实施例中，所述哺乳动物的皮肤为猪、牛、羊或马的皮肤。

在一个实施例中，所述将所述真皮层皮片依次浸泡在质量百分含量为0.5％～3％的碱溶液及有机溶剂中进行脱脂的操作中，所述真皮层皮片与所述碱溶液的体积比为1：1～4，所述碱溶液的溶质选自碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠和氢氧化钾中的一种，所述真皮层皮片浸泡在所述碱溶液中的时间为6h～24h；