[发明专利]用于检测表皮生长因子基因突变的引物及试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及用于检测表皮生长因子基因突变的引物、方法和试剂盒。

背景技术

表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)是一种由53个氨基酸残基组成的小肽，分子量6201Da，分子内有6个半胱氨酸组成的二硫键，形成3个分子内环型结构，组成生物活性所必须的受体结合区域。人的EGF主要由唾液腺、肾脏及十二指肠的 Brunner氏腺等合成和分泌，广泛存在于血液、唾液、胃液、尿液、乳汁、羊水等体液中。EGF通过与靶细胞膜上高亲和细胞表面受体即表皮生长因子受体结合而发挥作用，参与多种细胞的生长、增殖和分化。EGF基因定位于4q25染色体上，全长约110kb，含有23个编码外显子。EGF基因突变引起EGF功能缺陷，导致低镁血症4型的发生。另外，该基因的功能失调还与某些癌症的发生、发展有关。目前仅发现3种与疾病相关的EGF基因突变类型。

对于EGF基因突变的检测通常为针对某一个热点突变进行检测，尚未有关于利用多个特异性引物对EGF基因多个突变同时进行测定的报道。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种检测EGF基因突变的引物和试剂盒。

本发明的另一目的是提供一种非诊断目的检测EGF基因的全部编码外显子及外显子/内含子交界区突变的方法。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

一种检测EGF基因突变的引物，包括扩增EGF基因23个编码外显子及外显子/内含子交界区的引物，其引物序列如SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.46所示，具体如下：

EGF-P1-F：5’–CAGTGAAGTCAGCCAGAGCA -3’；(SEQ ID NO.1)

EGF-P1-R：5’–CCAAGCAATTAGCCAGGTGT -3’； (SEQ ID NO.2)

EGF-P2-F：5’–GTTGGTTGTCATTGGGAAGT -3’；(SEQ ID NO.3)

EGF-P2-R：5’–CTATATTTGGCAGACACGCA -3’； (SEQ ID NO.4)

EGF-P3-F：5’–GGGTCAGAGGAGGTAAATGC -3’；(SEQ ID NO.5)

EGF-P3-R：5’–CAAAAGAGGGCTTTGGTCTC -3’；(SEQ ID NO.6)

EGF-P4-F：5’–AAACTTGCCCTGTGAAGGAG -3’；(SEQ ID NO.7)

EGF-P4-R：5’–ACAGACGGTAAATCTGGAGC -3’；(SEQ ID NO.8)

EGF-P5-F：5’–TCTTCCCCATTTTCATCACA -3’；(SEQ ID NO.9)

EGF-P5-R：5’–TGAATGGGTGGGAACTATGT -3’；(SEQ ID NO.10)

EGF-P6-F：5’–GACTTATTTTACCCTTTGCT -3’；(SEQ ID NO.11)

EGF-P6-R：5’–TCATAGCCACCTTAGAAACA -3’；(SEQ ID NO.12)

EGF-P7-F：5’–AATTTTCAGGCATAACCACA -3’；(SEQ ID NO.13)

EGF-P7-R：5’–CTCAAAGCCCTTGCTCATA -3’； (SEQ ID NO.14)

EGF-P8-F：5’–AGCCTGGGTGAAAGAGTGA -3’；(SEQ ID NO.15)

EGF-P8-R：5’–AGTTCCAGACAACCACAGCA -3’；(SEQ ID NO.16)

EGF-P9-F：5’–CATCCTCTTGCCTGTCTTCA -3’；(SEQ ID NO.17)

EGF-P9-R：5’–AGTCTCCCATCCTCATCTCC -3’； (SEQ ID NO.18)

EGF-P10-F：5’–CAAGCTCTTAACACCCTGTA -3’；(SEQ ID NO.19)

EGF-P10-R：5’–TTGTTCAACTCCCACTTATG -3’；(SEQ ID NO.20)

EGF-P11-F：5’–TGGGCTTATTGCTGCTACT -3’；(SEQ ID NO.21)