[发明专利]一种芽孢杆菌及其同步糖化发酵生产L-乳酸的方法

权利要求书

1.一种芽孢杆菌，其特征在于，所述菌株为芽孢杆菌（Bacillus sp.）13002，于2013年4月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.7431。

2.一种同步糖化发酵生产L-乳酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）种子培养液制备：将处于对数期生长的权利要求1所述芽孢杆菌13002的菌悬液接种于种子培养基中，进行连续活化培养，得到种子培养液；所述种子培养基为：按照质量比计算，细菌学蛋白胨0.2份~1.0份，酵母提取粉0.1份~0.5份，葡萄糖1.0份~2.0份，NaCl 0.5份~1.5份，用蒸馏水定容至100份，调节pH至6.0~7.5，灭菌后冷却即可；

（2）同步糖化发酵L-乳酸：以体积比2~10：100的比例，将种子培养液接种于发酵培养基中，在发酵罐中启动发酵后，以恒定补料速率向发酵培养基中补充α-淀粉酶和糖化酶的混合液，培养至72 h~96 h收集发酵培养液。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基为：以重量份数计，15~25%的淀粉溶液60~80份，葡萄糖1.0~2.5份，氮源1.0~4.0份，七水合硫酸镁0.01~0.10份，用蒸馏水定容至100份，调培养基pH至6.0~7.5，灭菌后冷却至45~65 °C。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述氮源是指：酵母粉、蛋白胨、牛肉膏、豆粕水解液、酵母浸膏、玉米浆蛋白水解液中的一种或两种以上以任意比例组合。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述α-淀粉酶的添加量是以每100 g干淀粉加入α-淀粉酶为0.02~0.08 mL，以每100 g干淀粉加入糖化酶0.05~0.20 mL，两种酶混合后，用无菌水稀释5~10倍。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述α-淀粉酶的用量为0.03 mL/100 g干淀粉；糖化酶的用量为0.10 mL/100 g干淀粉。

7.根据权利要求2~6任意一项所述的方法，其特征在于，所述α-淀粉酶和糖化酶的混合液的流加速率为0.5~2.0 mL/min。

8.根据权利要求3~6任意一项所述的方法，其特征在于，所述淀粉为玉米淀粉、木薯淀粉、马铃薯淀粉、大米粉或糙米粉中的一种或两种以上。

9.根据权利要求2~6任意一项所述的方法，其特征在于，步骤（2）所述发酵温度为45~65°C。

10.根据权利要求2~6任意一项所述的方法，其特征在于，步骤（1）所述连续活化培养2~3次，发酵温度均为45 °C，培养时间均为24 h。