[发明专利]一种注射用总蟾毒内酯纳米脂质载体给药系统及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种注射用总蟾毒内酯纳米脂质载体给药系统及其制备方法

背景技术

中华大蟾蜍(BufobufogargarizansCantor)为蟾蜍科动物，蟾皮(theskinoftoad,ST)为蟾蜍的干燥表皮。《中华本草》记载其能“解毒散结，消积利水，杀虫消疳”，可被应用于多种肿瘤的治疗，对胃癌、食管癌、膀胱癌、肝癌、白血病有一定临床疗效，其性味性寒、味苦，有小毒，具有消炎解毒、消肿止痛、软坚散结、抑制肿瘤生长、调节免疫等功效。华蟾素提取自中药中华大蟾蜍皮，系采用传统方法水提醇沉法值得的中药注射液，华蟾素注射液抗肿瘤疗效显著，但存在杂质多、质量及临床疗效不稳定、毒副作用大等严重缺陷。经研究发现，华蟾素注射液中具抗肿瘤活性的总蟾毒内酯类(蟾毒配基类、蟾蜍毒素类)成分含量极低，目前尚未有生物碱成分有抗肿瘤活性的研究报道，且临床研究认为华蟾素不良反应心律失常、局部静脉刺激反应、皮肤反应、哮喘、超敏反应等均为水溶性吲哚类生物碱成分的药理作用所致。因此，提取纯化华蟾素的重点在于富集内酯类成分和去除生物碱及其他杂质成分，特别是生物碱成分。

对华蟾素提取液进行分离纯化，得华蟾素有效部位——总蟾毒内酯，主要含有蟾毒配基(resibufogenin)、华蟾酥毒基(cinobufagin)、蟾毒灵(bufalin)、蟾毒它灵(Bufotalin)、日蟾毒它灵-3-半辛二酸酯(Gamabufotalin-3-hydrogenSuberate)、蟾蜍灵-3-丁二酰精氨酸酯、华蟾毒精-3-丁二酰精氨酸酯等内酯类成分。目前市场上中药注射液普遍存在的诸多问题，开发出质量稳定、工艺先进、毒副作用少、疗效高的中药注射制剂是十分必要的，鉴于总蟾毒内酯具有独特的技术优势，我们对华蟾素注射液进行二次深度开发，研制了总蟾毒内酯冻干制剂——“注射用华蟾内酯”。

纳米脂质载体(NanostructuredLipidCarriers,NLC)作为第二代脂质纳米粒，由于引入了液态脂质，使得药物在纳米粒脂质核心中的溶解度增加，提高了纳米粒的载药量，并且大大减缓了脂质核心向完美晶型转变的速率，从而延缓了SLN的药物泄漏问题，更好地改善总蟾毒内酯缺陷。

发明内容

本发明针对总蟾毒内酯水溶性差，生物利用度低的问题，提供一种稳定的注射用总蟾毒内酯纳米脂质载体及其制备方法，其特征在于制备过程包含以下步骤：

(1)，将固态脂质、液态脂质、卵磷脂和药物加入到适量的甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、乙醇或组合形成的有机溶剂中，加热至65-80℃使之溶解，形成油相。

(2)，将表面活性剂加入到蒸馏水中形成水相，并加热保持与油相温度一致。

(3)，在搅拌条件下将(1)缓慢滴加入(2)中并持续搅拌，乳化时间维持1-3小时至有机溶剂挥发完全，得初乳液。

(4)，将(3)形成的初乳液迅速倒入适量冰水中，并保持与乳化过程相同转速，搅拌0.5-2小时后得总蟾毒内酯纳米脂质载体。

固体脂质材料可以是单硬脂酸甘油酯、双硬脂酸甘油酯、山嵛酸甘油酯、棕榈酸甘油酯、硬脂酸等，也可以是上述材料组成的混合固体脂质。

硬脂酸可以是SA单体，也可以是不同长度PEG修饰后的SA，如PEG2000-SA，PEG800-SA等。

液态脂质可以是中链或长链脂肪酸甘油酯、辛葵酸三甘油酯、油酸、维生素E、食用油等。

卵磷脂可以是蛋黄卵磷脂或大豆卵磷脂或氢化大豆卵磷脂，含量为0.5％-2.5％。

表面活性剂为非离子表面活性剂，如T80，F68，P188等，其含量为0.5％-2.5％。

液态脂质和固态脂质的比例可为1:20～1:1，优选的为3:10。

转速可以在400～1200转/分钟之间，优选的为700转/分钟。

初乳液与固化水的比例可为1:1～1:4，优选的为1:2.5。

对本发明中总蟾毒内酯脂质纳米粒大小、粒径分布和包封率评价实验如下：

1，将总蟾毒内酯纳米脂质载体溶液稀释数倍，用激光粒度仪分析测定其纳米粒大小和粒径分布。