[发明专利]腈水解酶、编码腈水解酶的核酸，以及制备和使用它们的方法

权利要求书

1.一种分离的或重组的核酸序列，其编码具有腈水解酶活性的多肽，所述核酸序列包括：与SEQIDNO:195、205、207、209或237、或者SEQIDNO:195、205、207、209或237的变体具有至少50％同一性的序列，具有如下一个或多个突变：位点163-165AAA，AAG，GGT，GGC，GGA，GGG，CAA或CAG；位点178-180GAA或GAG；位点331-333TCT，TCC，TCA，TCG，AGT或AGC；位点568-570CAT，CAC，TCT，TCC，TCA，TCG，AGT，AGC，ACT，ACC，ACA，TCA，TAT，TAC，ATG或ACG；位点571-573TTA，TTG，CTT，CTC，CTA，CTG，GTT，GTC，GTA，GTG，ATG，ACT，ACC，ACA，GAT，GAC，GGT，GGC，GGA，GGG，GAA，GAG，TAT，TAC或ACG；位点595-597GAA，GAG，TTA，TTG，CTT，CTC，CTA或CTG；和位点664-666TTA，TTG，CTT，CTC，CTA或CTG；或其任意组合，或其片段，其中所述核酸或片段编码具有腈水解酶活性的多肽，或其互补体。

2.一种分离的或重组的核酸，其与SEQIDNO:195、205、207、209或237或SEQIDNO:195、205、207、209或237的变体的核酸杂交，具有如下一个或多个突变：位点163-165AAA，AAG，GGT，GGC，GGA，GGG，CAA或CAG；位点178-180GAA或GAG；位点331-333TCT，TCC，TCA，TCG，AGT或AGC；位点568-570CAT，CAC，TCT，TCC，TCA，TCG，AGT，AGC，ACT，ACC，ACA，TCA，TAT，TAC，ATG或ACG；位点571-573TTA，TTG，CTT，CTC，CTA，CTG，GTT，GTC，GTA，GTG，ATG，ACT，ACC，ACA，GAT，GAC，GGT，GGC，GGA，GGG，GAA，GAG，TAT，TAC或ACG；位点595-597GAA，GAG，TTA，TTG，CTT，CTC，CTA或CTG；位点664-666TTA，TTG，CTT，CTC，CTA或CTG；或其任意组合，具有腈水解酶活性的片段，或其互补体。

3.一种核酸探针，包括约15个核苷酸至约50个核苷酸，其中至少15个连续核苷酸与SEQIDNO:195、205、207、209或237或SEQIDNO:195、205、207、209或237的变体的核酸序列内的核酸靶区域至少50％互补，具有如下一个或多个突变：位点163-165AAA，AAG，GGT，GGC，GGA，GGG，CAA或CAG；位点178-180GAA或GAG；位点331-333TCT，TCC，TCA，TCG，AGT或AGC；位点568-570CAT，CAC，TCT，TCC，TCA，TCG，AGT，AGC，ACT，ACC，ACA，TCA，TAT，TAC，ATG或ACG；位点571-573TTA，TTG，CTT，CTC，CTA，CTG，GTT，GTC，GTA，GTG，ATG，ACT，ACC，ACA，GAT，GAC，GGT，GGC，GGA，GGG，GAA，GAG，TAT，TAC或ACG；位点595-597GAA，GAG，TTA，TTG，CTT，CTC，CTA或CTG；位点664-666TTA，TTG，CTT，CTC，CTA或CTG；或其任意组合，或其互补体。

4.一种分离的或重组的核酸，其编码多肽，所述多肽包括具有与SEQIDNO:196、206、208、210或238或SEQIDNO:196、206、208、210或238的变体具有至少50％同一性的序列的氨基酸，具有如下一个或多个突变：在残基55处，赖氨酸，甘氨酸或谷氨酰胺；在残基60处，谷氨酸；在残基111处，丝氨酸；在残基190处，丝氨酸，组氨酸，酪氨酸或苏氨酸；在残基191处，亮氨酸，缬氨酸，甲硫氨酸，天冬氨酸，甘氨酸，谷氨酸，酪氨酸或苏氨酸；在残基199处，谷氨酸或亮氨酸；在残基222处，亮氨酸；或其任意组合，多肽编码片段，其中所述多肽具有腈水解酶活性，或其互补体。

5.一种组合物，包括至少一种权利要求1至3所述的核酸或包括至少一种权利要求7所述的多肽、或具有腈水解酶活性的其片段、或其肽模拟体、或其任意组合。