[发明专利]免疫细胞的冻存方法有效
申请号: | 201510515024.5 | 申请日: | 2015-08-20 |
公开(公告)号: | CN105076113B | 公开(公告)日: | 2017-12-05 |
发明(设计)人: | 陈海佳;王一飞;葛啸虎;应杰;万桦 | 申请(专利权)人: | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司11227 | 代理人: | 赵青朵 |
地址: | 510000 广东省广州市国*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 免疫 细胞 方法 | ||
1.免疫细胞的冻存方法,X-VIVO15无血清培养基重悬单个核细胞,缓慢加入同体积的冻存液,制成细胞冻存悬液,降温至-80℃后,-196℃超低温冻存;所述冻存液由DMSO、自体血浆和X-VIVO15培养基组成,DMSO:自体血浆:X-VIVO15培养基的体积比为1:2:2。
2.根据权利要求1所述的冻存方法,所述冻存液预先于2-8℃预冷。
3.根据权利要求1所述的冻存方法,所述细胞冻存悬液中冻存密度为4×106cell/mL-6×106cell/mL。
4.根据权利要求1所述的冻存方法,所述自体血浆预先经56℃灭活30min,0.22μm滤膜过滤。
5.根据权利要求1所述的冻存方法,所述降温速度为:
温度>-25℃时,1℃/min~2℃/min;
-25℃≥温度>-80℃时,5℃/min~7℃/min。
6.根据权利要求1所述的冻存方法,所述免疫细胞为NK细胞、CIK细胞或DC细胞。
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