[发明专利]一种乳制品真蛋白测定仪及其测定方法

说明书

技术领域

本发明属于属于乳制品真蛋白检测技术领域，尤其与一种乳制品真蛋白测定仪及其测定方法有关。

背景技术

乳制品是指使用牛乳或羊乳及其加工制品为主要原料，加入或不加入适量的维生素、矿物质和其他辅料，使用法律法规及标准规定所要求的条件，加工制作的产品。蛋白质是人体不可缺少的重要营养成分，乳制品为我们提供了大部分的蛋白质来源。因此测定乳制品中的蛋白质是评价乳制品质量的重要指标，同时，蛋白质也是其他许多食品中重要的营养指标。测定食品中蛋白质的含量，对于评价食品中的营养价值、提高产品质量、优化产品配方具有极其重要的作用。

然而，在利益的驱使下，不法商贩在乳制品中掺假的现象也屡屡发生。因此，提供一个快速、可靠、廉价的乳制品中蛋白质的检测方法对检验行业尤为重要。

目前国内外所采用的测定乳制品中的蛋白质的方法有很多，其中主要的检测方法有凯氏定氮法、双缩脲分光光度法、其衍生的Folin-酚试剂法、考马斯亮蓝法、紫外分光光度法以及最近发展起来的蛋白质检测仪和流动注射分光光度法等。其中凯氏定氮法因其测定结果准确、稳定性好、重复性强等优点被评为目前分析含氮化合物最常用的方法，此方法适用范围广，受到国内外的广泛采用和认可，但这种方法存在较多缺点，如操作过程繁琐、实际消耗量大、实验过程中会产生二氧化硫及硫化氢等有害气体等，不适合快速检测；双缩脲分光光度计法干扰物质少，但主要的缺点是灵敏度差。Folin-酚试剂法由于增加了一种增强显色的试剂，所以其灵敏度比双缩脲分光光度法高很多，但也需要更精确的控制操作时间，一般适合于测定蛋白质的相对浓度，也不适合快速检测；考马斯亮蓝法摒弃了双缩脲分光光度法和酚试剂法的明显缺点和使用限制，利用考马斯亮蓝染料测定蛋白质的吸光度，大大提高了灵敏度，测定快速、简便、干扰物质少，是目前测定蛋白质灵敏度最高的方法，但此法在测定不同蛋白质时有较大的差异，去污剂会造成少许干扰；紫外分光光度法简便、快速，但测定的准确度较差，干扰物质多。新型的检测方法主要有流动分光光度法、直接电位法测定和蛋白质测定仪等。其中流动分光光度法可实现样品和试剂自动同时定量，这种方法具有分析速度快、试剂消耗量少、检出限低、重现性好等优点，本法已成功用于乳制品中蛋白质含量的准确测定，满足了市场对乳制品中蛋白质含量的简便、快速、准确测定的需求，但其检测过程较复杂，仪器要求高，购买仪器所需费用较高，难以实现对市场上乳制品的现场快速分析。综上所述，上述方法都有局限性。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的旨在提供一种乳制品真蛋白测定仪及其测定方法。

为此，本发明采用以下技术方案：一种乳制品真蛋白测定仪，其特征是，所述的乳制品真蛋白测定仪包括电位计、溶解氧电极、测试杯体、磁力搅拌器和电流检测装置，所述的测试杯体底部贯通并固定在所述的磁力搅拌器上，磁力搅拌器上的搅拌杆置于所述测试杯体内腔中，所述的溶解氧电极通过导线与所述的电位计连接，溶解氧电极底部伸入测试杯体的内腔中，所述的电流检测装置检测测试杯体内腔中溶液的电流，所述的电位计、溶解氧电极、磁力搅拌器和电流检测装置通过控制系统控制工作。

一种乳制品真蛋白测定方法，包括以下步骤：

1.1、零氧校准：将亚硫酸钠溶液放入测定仪的测试杯体中并通以溶解氧电极，通过测定仪上的磁力搅拌器以一定速度对溶液进行搅拌，直至测定仪上的读数趋于稳定；

1.2、满度校准：把溶解氧电极用水冲洗干净后，用滤纸吸干薄膜表面的水分，并将电极置于空气中，直至测定仪上的读数趋于稳定；

1.3气压：气压设定值为101.3KPa；

2、甘氨酸标准品的测定

2.1、分别准备定量的甘氨酸溶液、2％的戊二醛溶液和pH为8.2的磷酸盐缓冲溶液；

2.2、测试杯上加入上述磷酸盐缓冲溶液和2％的戊二醛溶液，将溶解氧电极放入溶液中，待读数稳定时记录电流值和温度，加入甘氨酸标准溶液，记录时间，待电流值稳定后读取电流下降值，每一标准溶液测定三次，以电流下降值的平均值作为纵坐标(nA)，以甘氨酸溶液的浓度(mM)作为横坐标，绘制标准曲线；

3、样品的测定

3.1、分别取适量牛奶样品进行稀释，混匀备用，利用加标法分别测定样品溶液与加入甘氨酸标准品的样品溶液的电流下降值，每组重复测量三次，用电流下降的平均值计算样品的蛋白质含量，结果分别以甘氨酸的含量(g)/N的含量以及用N换算的蛋白质的含量计。