[发明专利]一种生化试剂蛋白胨的制备工艺

说明书

技术领域

本发明属于工业生化试剂领域，涉及一种以屠宰业的廉价原料猪血球，利用复配动物蛋白酶酶解制备生化试剂蛋白胨的工艺。

背景技术

目前国内猪血资源非常丰富，但有效利用率并不高，多数用来制作血豆腐、喷雾干燥为血球血浆蛋白粉，更多的被排放入周围环境中，产生极大污染，

申请公布号CN104498574A公开了一种猪血球蛋白胨的制备方法，包括分离、溶血、酶解、超滤膜分离、干燥步骤。但上述制备方法制得的猪血球蛋白胨溶解性效果不佳，产品总氮含量、氨基氮含量不高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种以猪血球为原料，制备总氮及氨基氮含量较高、无异味的生化试剂蛋白胨的方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种生化试剂蛋白胨的制备工艺，该工艺包括下述顺序的制备步骤：

取猪血离心后所得血球液加入蒸馏水搅拌溶血，再加入沸水搅拌溶血，得血球稀释液；测定血球稀释液pH值及温度，分别加入碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶酶解，得酶解液；将上述酶解液加热并保温，灭活蛋白酶，调节灭酶后酶解液pH并静置；静置后的酶解液离心，取上清液进行真空浓缩脱水，得浓缩液，将浓缩液喷雾干燥后即得到猪血蛋白胨。

所述的蒸馏水与沸水的加入量分别为血球液的1～1.5倍体积。

所述的血球稀释液pH值为6.8～8.0，加热至50～55℃。

所述的碱性蛋白酶按照原血球液1～2%的比例加入，酶解2～8h；中性蛋白酶按照原血球液1～2%的比例加入，酶解2～4h；复合蛋白酶按照原血球液0.5～1%的比例加入，反应1～2h。

所述的酶解液加热至80～90℃，保温处理20～30min，调节酶解液pH至5～5.5，静置2～12h，4000rpm离心15～30min，得到上清液。

所述的上清液进行真空浓缩，脱水45～55%。

本发明的有益效果：本发明工艺简单、营养价值高，制备的生化试剂蛋白胨产率高，总氮含量在20-45%，氨基氮含量在4-9%，可作为发酵工业、食品及其他轻工业的原料，提高了原料的附加值，同时消除原料向环境排放所带来的污染。

具体实施方式

本发明以屠宰业副产物猪血球为原料，制备生化试剂蛋白胨的工艺原理是用原血离心后血球，经稀释、溶血、变性加入特定比例的蛋白酶，经过数次酶解，灭酶、离心、喷雾干燥后最终制成富含多肽、氨基酸的蛋白胨产品。

实施例1

制备生化试剂蛋白胨，以屠宰场经检验检疫合格的猪血离心后所得血球液为原料。取管式离心机离心猪血所得血球液10kg，向血球液中先加入10kg蒸馏水，搅拌溶血5h，然后再加入15kg沸水搅拌溶血1h，测定血球稀释液pH为6.8，直接加热至55℃，按照原血球液2%的比例加入2709碱性蛋白酶，酶解6h，然后按照原血球液1%的比例加入1398中性蛋白酶酶解2h，接着按照原血球液0.5%的比例加入复合蛋白酶反应2h，酶解完成后，将酶解液加热至85℃，保温处理30min，灭活蛋白酶，将上述灭酶后酶解液用6M（即浓度为6mol/L）HCl调节pH至5，静置6h，静置后的酶解液4000rpm离心20min，得到上清液和沉淀。取上述步骤离心所得上清液进行真空浓缩，脱水55%，将脱水浓缩后所得浓缩液经喷雾干燥后即得到猪血蛋白胨。

本发明制备得到的生化试剂蛋白胨为淡黄色或乳白色粉末，无苦涩味、无血腥味，溶解性极佳，2%溶水pH为6.6，总氮含量45%，氨基氮含量9%，是优质的蛋白胨产品原料。

实施例2

制备生化试剂蛋白胨，以屠宰场经检验检疫合格的猪血离心后所得血球液为原料。取管式离心机离心猪血所得血球液10kg，向血球液中先加入15kg蒸馏水，搅拌溶血4h，然后再加入10kg沸水搅拌溶血1.5h，测定血球稀释液pH为8，直接加热至50℃，按照原血球液2%的比例加入2709碱性蛋白酶，酶解2h，然后按照原血球液1%的比例加入1398中性蛋白酶酶解2h，接着按照原血球液0.5%的比例加入复合蛋白酶反应2h，酶解完成后，将酶解液加热至85℃，保温处理20min，灭活蛋白酶，将上述灭酶后酶解液用6M（即浓度为6mol/L）HCl调节pH至5.5，静置12h，静置后的酶解液4000rpm离心30min，得到上清液和沉淀。取上述步骤离心所得上清液进行真空浓缩，脱水45%，将脱水浓缩后所得浓缩液经喷雾干燥后即得到猪血蛋白胨。