[发明专利]一种伞房花耳草组培苗的快速繁殖方法在审
申请号: | 201510518049.0 | 申请日: | 2015-08-21 |
公开(公告)号: | CN105104196A | 公开(公告)日: | 2015-12-02 |
发明(设计)人: | 韦范;韦坤华;李林轩;黄宝优;缪剑华;徐建平;李旻辉 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区药用植物园 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人: | 黄永校 |
地址: | 530023 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 伞房花耳草组培苗 快速 繁殖 方法 | ||
1.一种伞房花耳草组培苗的快速繁殖方法,其特征在于:该方法包括以下步骤:
(1)外植体的选择与消毒:取伞房花耳草的成熟未开裂果实作为外植体,依次用2%(v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1%(v/v)升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次,最后用消毒滤纸除去表面水分,得到外植体,其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水,
(2)种子萌发获得无菌试管苗:将步骤(1)得到的外植体在超净工作台上剥开,将种子接种到MS培养基中,在培养温度为23-27℃,光照强度1500lux,光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天,种子发芽后获得无菌试管苗,其中MS培养基中添加0.2mg/L的苄基腺嘌呤6-BA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂,培养基的pH值为5.8,
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养:将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中,在培养温度23-27℃,光照强度1500lux,光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽,其中MS繁殖培养基中添加0.5-3.0mg/L的苄基腺嘌呤6-BA、0.1-0.3mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1-1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂,培养基的pH值为5.8,
(4)丛生芽生根培养:将步骤(3)中得到的丛生芽切成带顶芽或叶芽的茎段,置于1/2MS生根培养基中,在培养温度23-27℃,光照强度1500lux,光照时间为12-14小时/天的条件下培养30天得到带根的完整植株,其中1/2MS生根培养基中添加0.1-1.0mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1-0.3mg/L的生根粉ABT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂,培养基的pH值为5.8,
(5)炼苗与移栽:步骤(4)获得带根的完整植株后,在室温为25℃的室内打开瓶盖,在瓶中加入少量自来水,炼苗2-4天,表面角质形成后将苗取出,洗净根部培养基,立即移栽到苗床中,在苗床中生长一个月后移栽大田。
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