[发明专利]血清高密度脂蛋白中胆固醇的测定试剂

权利要求书

1.血清高密度脂蛋白中胆固醇的测定试剂，包括适量防腐剂、稳定剂、色原、高亲和性酶化合物、表面活性剂、牛血清白蛋白，其特征在于：所述的高亲和性酶化合物是按照以下方法制备得到：

1)酶的活化：

①酶的选择：胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶和脂蛋白脂酶，三者按照5～1：1～5：1～1.5的比例混合；

②酶的预培养：将上述混合酶置于温度32～39℃、pH值5.5～8的缓冲溶液中预培养3～8小时，其中，所述的缓冲溶液是磷酸盐缓冲溶液或柠檬酸缓冲溶液；

③酶的活化培养：经预培养的混合酶转入由牛血清白蛋白、甘油、β-环糊精、EDTA-Na溶液、青霉素及无菌水混合液中，在温度34～39℃条件下活化培养5～10小时，得到活化酶混合缓冲液A；

④脱水反应：采用吸水剂制备过滤柱，将上述活化酶混合缓冲液A缓慢流经过滤柱，除去活化酶混合缓冲液中加入的游离水，并随时调节缓冲液pH值，使其维持在5.5～8；

2)制备高亲和性酶化合物

①化合物选择：甾类糖苷、三萜烯糖苷、蛋白质毒素和多烯类抗菌素中的一种或多种组合化合物组合，并且化合物采用公知手段进行催化活化，得到活化化合物组合物B；

②混合反应：将步骤1)得到的活化酶混合缓冲液A和步骤2)得到的活化化合物组合物B混合，并补充适量的缓冲溶液，在32～39℃条件下混合反应3～10小时，得到高亲和性酶化合物。

2.如权利要求1所述的血清高密度脂蛋白中胆固醇的测定试剂，其特征在于：该试剂由以下百分比的组分制成：高亲和性酶化合物68～73％、牛血清白蛋白23～30％、表面活性剂2.4～2.7％、防腐剂1.3～1.5％、稳定剂1.1～1.5％、色原0.2～0.3％，以上组合总量为100％。

3.如权利要求1所述的血清高密度脂蛋白中胆固醇的测定试剂，其特征在于：所述的活化酶混合缓冲液A与活化化合物组合物B混合比例为：1～2：3～10。

4.如权利要求1所述的血清高密度脂蛋白中胆固醇的测定试剂，其特征在于：在步骤③酶的活化培养中，所述的混合液组分配比为：牛血清白蛋白50～60％、甘油5～8％、β-环糊精1～3％、EDTA-Na溶液1～1.5％、青霉素0.5～0.8％、无菌水34～37％。