[发明专利]STCH基因敲除动物模型的构建方法及应用有效
申请号: | 201510519704.4 | 申请日: | 2015-08-21 |
公开(公告)号: | CN105112448B | 公开(公告)日: | 2020-06-26 |
发明(设计)人: | 徐国彤;吕立夏 | 申请(专利权)人: | 同济大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;A01K67/027;A61K49/00;A61K45/00;A61P25/24;A61P25/28 |
代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 赵志远 |
地址: | 200092 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | stch 基因 动物 模型 构建 方法 应用 | ||
1.一种STCH基因敲除动物模型用于抗抑郁药物筛选的应用,其特征在于,
所述STCH基因敲除动物模型为STCH条件性基因剔除小鼠,通过基因打靶的策略,在STCH基因外显子2两端插入方向相同的LoxP位点,当该小鼠在导入Cre重组酶的情况下,Cre重组酶通过识别LoxP位点,切除LoxP位点间的序列,达到在特定细胞中条件性剔除STCH基因的目的;
所述的STCH基因敲除动物模型的构建方法包括以下步骤:
1)在小鼠胚胎成纤维细胞滋养层上培养来源于129SV/J品系雄性小鼠的CJ7胚胎干细胞,收集通过针对于STCH基因外显子2的打靶载体产生突变的STCH基因敲除的胚胎干细胞,
2)制备小鼠供体囊胚,
3)将STCH基因敲除的胚胎干细胞注入所述的小鼠供体囊胚,
4)将含有STCH敲除胚胎干细胞的囊胚形成的胚胎移植到小鼠的子宫,
5)该胚胎在小鼠子宫内生长成小鼠,
6)获得进入种系的嵌合体小鼠,
7)得到进入种系的嵌合体小鼠与C57BL/6J小鼠回交后得到杂合子仔鼠。
2.根据权利要求1所述一种STCH基因敲除动物模型用于抗抑郁药物筛选的应用,其特征在于,包括以下步骤:
(1)给STCH基因敲除动物模型施用待筛选的测试药物;
(2)观察STCH基因敲除动物模型中的抑郁相关症状和/或指标,并与对照组进行比较;
其中,所述STCH基因敲除动物模型中抑郁相关症状有显著改善,则表示该测试物是潜在的抗抑郁药物。
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