[发明专利]一种干扰素A2b与胶原结合结构域的融合蛋白及其制备方法和用途有效
| 申请号： | 201510519872.3 | 申请日： | 2015-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN105296515B | 公开（公告）日： | 2018-11-06 |
| 发明（设计）人： | 解慧琪;胡骏亘;龚梅 | 申请（专利权）人： | 四川大学华西医院 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;C12N5/10;C12P21/00;C07K19/00;A61K38/21;A61P35/00 |
| 代理公司： | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峡;张娟 |
| 地址： | 610041 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 干扰素 a2b 胶原 结合 结构 融合 蛋白 及其 制备 方法 用途 | ||
1.SEQ ID NO：1~3任意一项所示的核苷酸序列。
2.一种重组载体，其特征在于：包含SEQ ID NO：1~3任意一项所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于：所述的重组载体是重组pET28a质粒。
4.一种重组菌或者转基因细胞系，其特征在于：它是包含权利要求2或者3所述的重组载体的重组菌或者转基因细胞系。
5.根据权利要求4所述的重组菌或者转基因细胞系，其特征在于：所述的重组菌为重组大肠杆菌。
6.一种干扰素A2b与胶原结合结构域的融合蛋白，其特征在于：它是由SEQ ID NO：1~3任意一项所示的核苷酸序列编码。
7.根据权利要求6所述的干扰素A2b与胶原结合结构域的融合蛋白，其特征在于：它的氨基酸序列如SEQ ID NO：4~6任意一项所示。
8.一种制备权利要求6或7所述干扰素A2b与胶原结合结构域的融合蛋白方法，其特征在于：包含如下步骤：
ⅰ、取权利要求5所述的重组大肠杆菌，接种到LB培养基上，37℃、 200 r/min培养12h，得菌液；
ⅱ、取步骤ⅰ的菌液按2ml：100ml的接种量转接至LB培养基中， 37℃、200r/min培养，至OD600 值达到0.8~1时，加入IPTG至终浓度为1mmol /L，诱导表达4h；
ⅲ、离心，得菌体，裂解，取上清，分离纯化，即得。
9.权利要求1所述核苷酸序列、权利要求2或3所述重组载体、权利要求4或5所述重组菌和/或权利要求6或7所述干扰素A2b与胶原结合结构域的融合蛋白在制备治疗抗肿瘤药物中的用途。
10.一种抗肿瘤药物，其特征在于：它是以权利要求6或7所述干扰素A2b与胶原结合结构域的融合蛋白为活性成分，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。
11.根据权利要求10所述的药物，其特征在于：所述制剂为缓释制剂。
12.根据权利要求11所述的药物，其特征在于：所述缓释制剂的辅料为胶原，其中，融合蛋白与胶原的重量比为138:1000。
13.根据权利要求12所述的药物，其特征在于：所述胶原为I型胶原。
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