[发明专利]一种降解柚皮苷的菌种及方法

说明书

本发明涉及一种降解柚皮苷的菌种及方法，提供一种能够降解柚皮苷的菌种叶杆菌Wb51b(Phyllobacterium sp.)。在一定条件下，以2g/L的柚皮苷为唯一碳源培养菌种72h，菌体浓度达0.45g/L，柚皮苷含量降为0.0037g/L，几乎被完全降解。直接用游离细胞降解0.6g/L的柚皮苷，反应时间30min，柚皮苷的含量降为0.1g/L，降解率达83.3％；用固定化细胞降解1.2g/L柚皮苷，反应时间60min，柚皮苷的含量降为0.076g/L，降解率达93.7％。该菌种能够高效降解柚皮苷，对营养要求简单、易培养；此外，该菌种无致病性，可直接应用于食品工业。

技术领域

本发明涉及一种叶杆菌，尤其是涉及其降解柚皮苷的方法。

背景技术

柚皮苷(Naringenine-7-rhamnosidoglucoside)，又名柚甙、柑橘甙、异橙皮甙，是蜜柚果皮中最主要的苦味物质。减少柚皮苷的含量，建立蜜柚果汁脱苦的产业化技术将给饮料工业带来重大的进步。近年来，微生物降解柚皮苷的方法越来越引起人们的重视，涉及微生物的种类有真菌，细菌和酵母等，其中真菌生产柚苷酶来降解柚皮苷已经取得一定的成果；而细菌降解柚皮苷的研究还较少。

随着蜜柚种植面积不断扩大，蜜柚产量逐年上升，每年单是福建省的蜜柚产值就达到6000万吨，但是由于深加工技术研究滞后，尚未实现产业化的深加工，产供销矛盾日益突出，导致大量的果实被丢弃，丢弃果实腐烂的恶臭气味又严重污染了环境。蜜柚榨汁是蜜柚深加工的主要手段，但是获得的鲜果汁具有明显的苦味，需要除去柚皮苷，进行脱苦处理后才能饮用。因此，如何有效降解柚皮苷成为一个紧迫的课题。

目前蜜柚汁脱苦的主要方法有物理吸附法，食品添加剂方法和生物酶制剂等方法。物理吸附法在吸附苦味物质的同时，也将吸附果汁中的营养成分，食品添加剂法只是将苦味物质掩蔽，并没有将其除去；而生物酶制剂法，中国专利201010219099.6(公开号CN101897452A，公开时间2010年12月1日)公开了一种蜜柚果汁脱苦酶的发酵生产方法，该方法需要对酶进行分离纯化，此过程的成本较高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种降解柚皮苷的菌种叶杆菌(Phyllobacterium sp.)Wb51b。

所述菌种为叶杆菌(Phyllobacterium sp.)Wb51b，从土壤样品中筛选得到，已于2012年保藏于中国普通微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所)，该保藏中心登记入册编号为CGMCC No.6472。

本发明的另一个目的在于提供一种降解柚皮苷的方法。

该方法利用叶杆菌(Phyllobacterium sp.)降解柚皮苷。具体步骤包括：将叶杆菌(Phyllobacterium sp.)接种入含有柚皮苷的培养基，进行培养，并使用所培养的游离细胞、进行固定化后的细胞或其混合形态，来降解柚皮苷。

本发明采用上述馆藏号为CGMCC No.6472的叶杆菌降解柚皮苷。

所述进行培养的初始pH值为3.5～8.5，优选3.5～6.5，更优选3.0～5.0。

所述培养时间12小时～7天，优选24h～72h，更优选48h～72h。

所述培养温度优选25～50℃，优选25～35℃，更优选30～35℃。

可利用海藻酸钠对细胞进行固定化。

可重复利用固定化细胞降解柚皮苷。

本发明的突出优点在于：

1.本发明所用菌种为细菌，能够高效降解柚皮苷，对营养要求简单、易培养。