[发明专利]一种小肽及由该小肽连接形成的组合物

说明书

本发明涉及生物医药工程技术领域，具体涉及一种小肽，及其筛选方法与应用，在应用方面涉及由该小肽连接载体部分和靶向肽组成的递送组合物和由该小肽连接载体部分和具有促进免疫功能的短肽组成的具有促进免疫功能的组合物。

技术领域

本发明涉及生物医药工程技术领域，具体涉及一种小肽，及其筛选方法与应用，在应用方面涉及由该小肽连接载体部分和靶向肽组成的递送组合物和由该小肽连接载体部分和具有促进免疫功能的短肽组成的具有促进免疫功能的组合物。

背景技术

exosome是一种由细胞及体液分泌的生物纳米囊泡结构，直径约为30-100nm，能够携带内源的mRNA、miRNA和蛋白等，是生物体内天然的细胞信使，可以介导细胞间信号传导、细胞物质的交换以及细胞中抗原的递呈等生物学过程。最近的研究表明，exosome具备携带供体细胞生物学信息的特性，可作为临床疾病诊断的指标、其携带miRNA的exosome可以用于肿瘤的治疗、通过将药物转载到exosome中，可作为生物纳米药物运输载体等方面。但目前对于exosome的表面修饰的研究报道较少，已有的研究均为利用重组质粒将靶向短肽和exosome表面膜蛋白在细胞水平进行重组表达，通过收集释放的exosome，达到对exosome的表面修饰。但由于该方法存在质粒转染效率较低、靶向短肽融合表达表达构象不清以及exosome回收效率较低等缺点，严重影响到exosome做为运输载体的开发应用前景。因此，研发一种新型高效的exosome表面修饰方法，对于exosome作为运输载体的研究具有非常重要的意义。

本发明利用exosome膜表面稳定表达的膜蛋白CD63进行噬菌体展示文库筛选，获得和CD63蛋白特异性结合的小肽，并确认小肽和exosome表面的CD63蛋白具有特异结合的能力，并能够将特定的靶向短肽或具有促进免疫功能的短肽连接到exosome表面，达到对exosome的表面进行修饰的目的。通过对修饰后exosome在体内、体外功能的检测，确定小肽作为linker短肽的修饰方法可行，为后续的研究提供一种高效、简便的修饰手段。

发明内容

本发明创造提供一种小肽及由该小肽连接形成的组合物，其中所述小肽的多核苷酸包含选自SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:13或SEQ ID NO:15或SEQ ID NO:17或SEQ ID NO:19或SEQ IDNO:21或SEQ ID NO:23或SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:27或SEQ ID NO:29或SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:33或SEQ ID NO:35或SEQ ID NO:37或SEQ ID NO:39或与上述任一序列具有至少80％同源性的序列，再优选为至少具有90％相同性，更优选为至少具有95％、96％、97％、98％、99％的相同性。

其中所述小肽的氨基酸序列为与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:12或SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:16或SEQ IDNO:18或SEQ ID NO:20或SEQ ID NO:22或SEQ ID NO:24或SEQ ID NO:26或SEQ ID NO:28或SEQ ID NO:30或SEQ ID NO:32或SEQ ID NO:34或SEQ ID NO:36或SEQ ID NO:38或SEQ IDNO:40具有至少80％同源性的序列，再优选为至少具有90％相同性，更优选为至少具有95％、96％、97％、98％、99％的相同性。