[发明专利]一种Nα-芴甲氧羰基-Nε-棕榈酰基-赖/鸟氨酸的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种赖/鸟氨酸衍生物的制备方法，尤其是Nα-芴甲氧羰基-Nε-棕榈酰基-赖/鸟氨酸的制备方法。

背景技术

Nα-芴甲氧羰基-Nε-棕榈酰基-赖氨酸（Fmoc-Lys(Palmitoyl)-OH）是一种常用的氨基酸保护试剂，Cas号:201004-46-8，分子式：C37H54N2O5，分子量：606.9。棕榈酰基在设计合成两亲性多肽中可作为疏水端存在，在形成多肽空间结构中具有重要作用。在以往的合成中，有两条路线可供选择：第一条路线：先用铜盐等金属离子将赖氨酸的α氨基和羧基螯合，再在碱性条件下使ε氨基与棕榈酰氯反应，再用乙二胺四乙酸二钠盐解离铜盐，得到Nε-棕榈酰基-赖氨酸，Nε-棕榈酰基-赖氨酸再与芴甲氧羰基琥珀酰亚胺反应得到产物Nα-芴甲氧羰基-Nε-棕榈酰基-赖氨酸。在操作过程中，这条路线有以下几个缺点：第一，棕榈酰氯疏水性较强，在反应过程中很不彻底。第二，棕榈酰氯具有较强刺激性，对环境和人的身体健康都不利。第三，产生大量铜盐废水，不利于后期环保处理。第二条路线：医药化学杂志J.Med.Chem.2001,44,3504-3510中AnnaM.Papini等人所述，将棕榈酸与五氟苯酚缩合成酯，得到棕榈酸五氟苯酚酯，与由Nα-芴甲氧羰基-Nε-叔丁氧羰基-赖氨酸脱叔丁氧羰基所得Nα-芴甲氧羰基-赖氨酸在N,N-二甲基甲酰胺中耦合，得到最终产物Nα-芴甲氧羰基-Nε-棕榈酰基-赖氨酸，这条路线也有缺点：第一，所用五氟苯酚较贵，而且市面上常常断货。所用试剂中，，N-甲基吗啡啉、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑相对于一般试剂也较贵。第二，反应中用到的N,N-二甲基甲酰胺，沸点很高，不容易脱除溶剂。

发明内容

本发明的目的是提供一种Nα-芴甲氧羰基-Nε-棕榈酰基-赖/鸟氨酸的制备方法，主要解决现有合成方法中的操作难度大、试剂昂贵以及废水问题。

本发明的技术方案为：一种Nα-芴甲氧羰基-Nε-棕榈酰基-赖/鸟氨酸的制备方法，包括以下步骤：棕榈酸与N-羟基琥珀酰亚胺在缩合剂催化下缩合生成棕榈酸酰基琥珀酰亚胺，棕榈酰基琥珀酰亚胺再与Nα-芴甲氧羰基-赖/鸟氨酸盐酸盐反应生成Nα-芴甲氧羰基-Nε-棕榈酰基-赖/鸟氨酸。

所述缩合剂为N,N'-二异丙基碳二亚胺（DIC），N,N'-二环己基碳二亚胺（DCC），1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC.HCl)三者之一。

具体操作步骤为，将棕榈酸和N-羟基琥珀酰亚胺加入到乙酸乙酯中，用冰盐浴降温到-10℃到0℃之间，滴加缩合剂的乙酸乙酯溶液，保持温度在-5℃到5℃之间，完毕，室温（20-30℃）搅拌过夜（12-16小时），过滤去盐，有机相用饱和食盐水洗涤三次，用硫酸钠干燥，过滤去除硫酸钠，蒸干乙酸乙酯，得到中间体棕榈酸酰基琥珀酰亚胺。Nα-芴甲氧羰基-赖/鸟氨酸盐酸盐加入到丙酮和水的混合溶剂中，降温，保持温度在0℃到15℃之间，加入有机碱或者无机碱，中间体棕榈酸酰基琥珀酰亚胺溶于3倍量体积的丙酮中，分批加入到上述反应体系，并用碱液维持pH值在8-10，直到反应结束，加入水和乙醚，分层去乙醚相，水相保留，再加入乙酸乙酯和碎冰，并用稀盐酸酸化体系，直到pH为2-3，分层去水相，保留乙酸乙酯相，乙酸乙酯相用饱和食盐水洗涤三次，用硫酸钠干燥，过滤去除硫酸钠，蒸去全部乙酸乙酯，用乙醚-石油醚体系结晶，得到最终产物Nα-芴甲氧羰基-Nε-棕榈酰基-赖/鸟氨酸。

其所述有机碱为三乙胺，N-甲基吗啡啉或者其他溶于有机溶剂的弱碱。优选的有机碱为三乙胺或N-甲基吗啡啉。

其所述无机碱为碳酸钠，碳酸氢钠，碳酸钾或其他无机弱碱。优选的无机碱为碳酸钠，碳酸氢钠或碳酸钾中的一种。

其所述赖氨酸包括L-赖氨酸、DL-赖氨酸或D-赖氨酸中的一种。

鸟氨酸也包括L-鸟氨酸、DL-鸟氨酸或D-鸟氨酸中的一种。

本发明的有益效果是：本发明提供了一种Nα-芴甲氧羰基-Nε-棕榈酰基-赖/鸟氨酸的制备方法，避免了使用刺激性较大对身体有害的棕榈酰氯，不产生蓝色铜盐废水。避免使用较贵且不方便购买的五氟苯酚，本方法使用的试剂都较为常见普通并且价格便宜，降低了成本，而且环境友好。避免使用高沸点溶剂N,N-二甲基甲酰胺，反应后处理较为方便。整个反应过程显得简洁高效。

附图说明

图1为本发明产品的红外图谱。

图2为本发明产品的核磁共振图谱。