[发明专利]重组核酸片段RecCR012083及其检测方法有效
申请号: | 201510524538.7 | 申请日: | 2015-08-24 |
公开(公告)号: | CN106480057B | 公开(公告)日: | 2020-12-11 |
发明(设计)人: | 何予卿;姜恭好;喻辉辉;刘刚;陆青;雷昉;律文堂;姚玥;潘丽;李旭;李菁;韦懿;陈光;周发松;张启发 | 申请(专利权)人: | 中国种子集团有限公司 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/11;C12Q1/6895;A01H1/02;A01H1/04 |
代理公司: | 北京英赛嘉华知识产权代理有限责任公司 11204 | 代理人: | 王达佐;洪欣 |
地址: | 100045 北京市西*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 重组 核酸 片段 reccr012083 及其 检测 方法 | ||
1.重组核酸片段,其由以下的第一重组核酸片段和第二重组核酸片段组成:
-第一重组核酸片段,其为SEQ ID NO:1所示序列的序列或其互补序列;
-第二重组核酸片段,其为SEQ ID NO:2所示序列的序列或其互补序列。
2.检测权利要求1所述片段的引物组,其中所述引物组由以下的检测第一重组核酸片段的引物和检测第二重组核酸片段的引物组成:
-检测第一重组核酸片段的引物,其选自:
(I)特异性识别SEQ ID NO:1所示序列1-153位核苷酸的序列的正向引物和特异性识别SEQ ID NO:1所示序列727-1161位核苷酸的序列的反向引物;
(II)以下第一组引物对与第二组引物对的组合,其包含
(a)第一组引物对:特异性识别SEQ ID NO:1所示序列第1-153位核苷酸的序列的正向引物和特异性识别SEQ ID NO:1所示序列第154-726位核苷酸的序列的反向引物;和
(b)第二组引物对:特异性识别SEQ ID NO:1所示序列第154-726位核苷酸的序列的正向引物和特异性识别SEQ ID NO:1所示序列第727-1161位核苷酸的序列的反向引物;
-检测第二重组核酸片段的引物,其选自:
(III)特异性识别SEQ ID NO:2所示序列1-356位核苷酸的序列的正向引物和特异性识别SEQ ID NO:2所示序列1008-1278位核苷酸的序列的反向引物;
(VI)以下第三组引物对与第四组引物对的组合,其包含
(c)第三组引物对:特异性识别SEQ ID NO:2所示序列第1-356位核苷酸的序列的正向引物和特异性识别SEQ ID NO:2所示序列第357-1007位核苷酸的序列的反向引物;和
(d)第四组引物对:特异性识别SEQ ID NO:2所示序列第357-1007位核苷酸的序列的正向引物和特异性识别SEQ ID NO:2所示序列第1008-1278位核苷酸的序列的反向引物。
3.检测权利要求1所述片段的引物组,其中所述引物组为:
(I)扩增SEQ ID NO:1所示序列的引物对
5’-TTCGTGAACTAAACAGGTCCTAA-3’,
5’-GAGCAAATAGTGAGTGCGTAAGG-3’;
(II)测序SEQ ID NO:1所示序列的引物
5’-GCATTTGAATTGGACCTAG-3’;
5’-GTGGAACTTGGAAGGGACAG-3’;
5’-GCTCGCCTAGAACTTGTGAC-3’;
(III)扩增SEQ ID NO:2所示序列的引物对
5’-GATTCTATTTCCCATCCTCCTTC-3’,
5’-GACTGCTAAACGCTACTCCGTAA-3’;以及
(IV)测序SEQ ID NO:2所示序列的引物
5’-CTCCTGGCTGCCTGTAGTGC-3’;
5’-AAGTCTAAAGAGGGAGTGGG-3’;
5’-AAGACTGAACCAACCACCAT-3’。
4.检测权利要求1所述的重组核酸片段的方法,其包括采用权利要求2或3所述的引物组,以待测基因组为模板进行PCR反应,并分析PCR产物的步骤。
5.检测权利要求1所述的重组核酸片段的试剂盒,其包括权利要求2或3所述的引物组。
6.筛选含有权利要求1所述的重组核酸片段的水稻植株或种子的方法,其包括检测待测水稻植株或种子的基因组中是否含有权利要求1所述的重组核酸片段的步骤。
7.如权利要求6所述的方法,其中采用权利要求2或3所述的引物组来检测待测水稻植株或种子的基因组中是否含有权利要求1所述的重组核酸片段。
8.如权利要求6所述的方法,其中采用权利要求4所述的方法来检测待测水稻植株或种子的基因组中是否含有权利要求1所述的重组核酸片段。
9.如权利要求6所述的方法,其中采用权利要求5所述的试剂盒来检测待测水稻植株或种子的基因组中是否含有权利要求1所述的重组核酸片段。
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