[发明专利]一种重金属定量检测系统以及定量检测重金属的方法

权利要求书

1.一种改性胶体金的制备方法，其特征在于：它包括如下步骤：

（1）取直径为10～60nm的胶体金溶液100份，加入胶体金溶液体积的0.1~3%的二(三乙醇胺)钛酸二异丙酯溶液，二(三乙醇胺)钛酸二异丙酯溶液的浓度为1%，100～400r/min下搅拌0.5～2h，得混合溶液；

（2）调节上述混合溶液pH值至8～10，加入0.1～2份钛酸正丁酯，在室温下以100～400r/min搅拌反应24～36小时，在4000～16000r/min条件下离心5～60min，吸出上清液加入超纯水或缓冲液清洗，重复1～2次，即制备得表面含有活性-OH的钛酸酯改性的胶体金颗粒。

2.一种金标抗体的制备方法，其特征在于：按照权利要求1的方法制备改性胶体金，按每100mL加入0.2～2mg抗体，反应2h，在6000～12000r/min条件下离心5～60min，去上清液，用复溶液定溶至胶体金溶液体积的1/20，即得金标抗体。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述抗体为Cd单克隆抗体、Pb单克隆抗体、Hg单克隆抗体、As单克隆抗体、Cr单克隆抗体或Cu单克隆抗体。

4.一种检测重金属的胶体金免疫层析试剂盒，其特征在于：它包括检测试纸和卡壳，试纸置于卡壳中；所述检测试纸包括塑料底板（1），一端粘贴样品垫（2），样品垫的一端紧密压接着含有胶体金标记的所检测重金属相对应抗体的胶体金垫（3），胶体金垫（3）一端紧密压接着硝酸纤维素膜（4），硝酸纤维素膜上包被有检测线T和质控线C（5），检测线T包被着待检重金属的完全抗原，质控线C上包被有抗鼠IgG抗体，硝酸纤维素膜另一端连接吸样垫（6）；所述卡壳表面对应样品垫（2）的位置设有加样孔（7），卡壳表面对应硝酸纤维素膜（4）的位置设有观察口（8）；

其中，胶体金垫上的胶体金为权利要求1的方法制备的改性胶体金。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：所述胶体金垫上的金标抗体为权利要求2或3的方法制备的金标抗体。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于：所述重金属的完全抗原是重金属与络合剂络合后，与载体蛋白相偶联形成抗原，其中，所述络合剂是柠檬酸、乙二胺四乙酸、氨基乙酸、1-(4-异硫氰苄基)乙烯基二胺-N,N,N',N'-四乙酸、二乙烯三胺五羧酸盐、谷胱甘肽和有机多齿配体中的一种或多种；所述载体蛋白是牛血清白蛋白、匙孔血蓝蛋白、卵清蛋白、人血清蛋白中的一种或多种。

7.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于：所述硝酸纤维素膜是孔径5-12微米的多孔样结构膜，所述样品垫为玻璃纤维素膜或聚酯膜，所述吸样垫为吸水滤纸。

8.一种重金属定量检测系统，其特征在于：它包括权利要求4~7任意一项所述的胶体金免疫层析试剂盒、干式恒温仪和胶体金读数仪，其中，胶体金读数仪是一种手持式胶体金读数仪。

9.一种定量检测重金属的方法，其特征在于：它是权利要求8所述的检测系统进行检测。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：它包括如下步骤：

1）使用粉碎机粉碎所需检测样品，并过20目筛网；

2）取待检样品，加入提取剂，每g样品加入2～8倍mL提取剂，在震荡频率为2～60cpm条件下反应5～30min，过滤，取上清，加入上清2～40倍体积的稀释液，混匀，得混合液；所述提取剂是浓度为1～15%的硝酸溶液；所述稀释液为添加有表面活性剂、重金属络合剂的缓冲溶液；

3）将权利要求4~7任意一项所述的胶体金免疫层析试剂盒和步骤2）制备的混合液分别放入干式恒温仪中，恒温2～15min，温度设定为20～45℃；

4）在干式恒温仪中，将步骤2）制备的混合液加入试剂盒的加样孔中，恒温反应5～30min；

5）将反应后的试剂盒，置于胶体金读数仪中，读取数据即可。