[发明专利]一种用于动物药材DNA条形码鉴定的方法及PCR试剂盒在审
申请号: | 201510532874.6 | 申请日: | 2015-08-27 |
公开(公告)号: | CN105112525A | 公开(公告)日: | 2015-12-02 |
发明(设计)人: | 石林春;宋经元;庞晓慧;姚辉;韩建萍;陈士林 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院药用植物研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 中国商标专利事务所有限公司 11234 | 代理人: | 宋义兴 |
地址: | 100193 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 动物 药材 dna 条形码 鉴定 方法 pcr 试剂盒 | ||
1.一种用于动物药材DNA条形码鉴定的PCR试剂盒,其特征在于,包括PCR反应增强剂,所述PCR反应增强剂包括牛血清白蛋白、二硫苏糖醇、甜菜碱、乙基苯基聚乙二醇。
2.根据权利要求1所述的PCR试剂盒,其特征在于,所述PCR试剂盒中,每微升体积包括:牛血清白蛋白60-100微克、二硫苏糖醇5-14微摩尔、甜菜碱0.5-1.5摩尔、乙基苯基聚乙二醇0.1-1wt%。
3.根据权利要求1所述的PCR试剂盒,其特征在于,还包括扩增引物。
4.根据权利要求3所述的PCR试剂盒,其特征在于,所述引物为:
引物R:GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG
引物F:TAAACTTTCAGGGTGACCAAAAAATCA。
5.根据权利要求1所述的PCR试剂盒,其特征在于,还包括缓冲液、DNA聚合酶、dNTP中的任意一种或几种。
6.一种用于动物药材DNA条形码鉴定的方法,其特征在于,包括:
提供模板DNA,所述模板DNA源自动物药材;
进行PCR反应,所述PCR反应体系包括:所述模板DNA、缓冲液、dNTP、扩增引物、DNA聚合酶以及权利要求1所述PCR反应增强剂;
鉴定DNA。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述PCR反应体系中,包括:
8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述PCR反应中,程序包括:
94℃,1min——(94℃,1min——45℃,1.5min——72℃,1min)进行5个循环;
94℃,30s——(50℃,30s——72℃,1min)进行35个循环;
72℃,5min;
结束。
9.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述模板DNA选自动物的肉、角、骨、甲、壳等物质中的任意一种或几种。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述动物药材包括如下种类中的任意一种或几种:羚羊角、鹿茸、紫河车、鹿角、土鳖虫、水牛角、海龙、鳖甲、龟甲、熊胆粉、穿山甲、金钱白花蛇、乌梢蛇、蕲蛇、蛇蜕、海马、地龙、僵蚕、九香虫、蜈蚣、桑螵蛸、蛤蚧、鸡内金、石决明、斑蝥、全蝎、水蛭。
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