[发明专利]二乙氨乙基化葡聚糖修饰以琼脂糖凝胶为基础的色谱介质及制备方法和应用有效
申请号: | 201510533005.5 | 申请日: | 2015-08-27 |
公开(公告)号: | CN105195115B | 公开(公告)日: | 2017-09-19 |
发明(设计)人: | 余林玲;白姝;龚玲莉;孙彦 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | B01J20/291 | 分类号: | B01J20/291;B01J20/286;B01J20/26;B01J20/30;C08B37/12;C08B37/02;C07K1/22 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所12201 | 代理人: | 王丽 |
地址: | 300072 天*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 二乙氨 乙基 聚糖 修饰 琼脂 凝胶 基础 色谱 介质 制备 方法 应用 | ||
1.二乙氨乙基化葡聚糖(DEAE Dextran)修饰以琼脂糖凝胶为基础的色谱介质,其特征是在琼脂糖凝胶为基础的颗粒表面通过引进环氧基间隔臂进而修饰DEAE Dextran;结构式如下:
2.如权利要求1所述的色谱介质,其特征是DEAE Dextran的分子量为300-500kDa。
3.如权利要求1所述的二乙氨乙基化葡聚糖(DEAE Dextran)修饰以琼脂糖凝胶为基础的色谱介质,其特征是结构式(Ⅰ)的色谱介质的制备方法是:利用环氧氯丙烷活化法在琼脂糖凝胶为基础的颗粒表面引进环氧基间隔臂,然后在平均环氧基密度大于40mmol/L的琼脂糖凝胶介质中加入等体积的DEAE Dextran溶液,使DEAE Dextran充分扩散到介质孔道内;然后向介质悬浮液中加入氢氧化钠溶液,置于恒温水浴摇床中反应;反应产物经去离子水反复冲洗至中性后,用硼氢化钠溶液还原琼脂糖凝胶介质表面残留的环氧基,还原后的琼脂糖凝胶介质再次用去离子水反复冲洗,得到结构式(Ⅰ)的琼脂糖表面修饰DEAE Dextran介质。
4.如权利要求3所述的色谱介质,其特征是所述的DEAE Dextran溶液浓度为200-600mg/mL;置于20-35℃的恒温水浴摇床中,120-200rpm搅拌混合1-12h,使DEAE Dextran充分扩散到介质孔道内。
5.如权利要求3所述的色谱介质,其特征是所述的氢氧化钠溶液浓度为0.1-2mol/L,氢氧化钠溶液体积用量为活化的琼脂糖凝胶介质体积量的0.1-2倍,置于20-35℃恒温水浴摇床中,120-200rpm下反应12-60h。
6.如权利要求3所述的色谱介质,其特征是所述的硼氢化钠溶液浓度为0.3g/L-1g/L。
7.如权利要求1所述的二乙氨乙基化葡聚糖(DEAE Dextran)修饰以琼脂糖凝胶为基础的色谱介质,其特征是结构式(Ⅱ)色谱介质的制备方法是:在琼脂糖凝胶表面偶联二乙氨乙基,利用环氧氯丙烷活化法在以表面偶联二乙氨乙基的琼脂糖凝胶为基础的颗粒表面引进环氧基间隔臂,然后方法与权利要求3的方法相同,得到结构式(Ⅱ)的在琼脂糖凝胶为基础的表面修饰DEAE Dextran介质。
8.如权利要求7所述的色谱介质,其特征是偶联DEAE的琼脂糖凝胶介质的DEAE密度为30-103mmol/L。
9.如权利要求1所述的二乙氨乙基化葡聚糖修饰以琼脂糖凝胶为基础的色谱介质应用于蛋白质高效分离纯化中,提升蛋白质的吸附容量和吸附速率。
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