[发明专利]PH450酶的大量制备方法有效
| 申请号： | 201510533850.2 | 申请日： | 2015-08-27 |
| 公开（公告）号： | CN105112378B | 公开（公告）日： | 2018-10-30 |
| 发明（设计）人： | 沃纳·阿尔伯 | 申请（专利权）人： | 深圳无斑时代科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02 |
| 代理公司： | 北京市中闻律师事务所 11388 | 代理人： | 王红俊;常亚春 |
| 地址： | 广东省深圳市南山区蛇*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | ph450 大量 制备 方法 | ||
1.一种PH450酶的大量制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
获取蓝藻并进行大量培养，并在培养过程中用PH450酶诱导剂进行诱导；
在所述大量培养结束后收集蓝藻细胞，提取蓝藻细胞总蛋白；
用人PH450酶作为抗原进行免疫反应，制备多克隆抗体；
以所述多克隆抗体作为亲和介质制备亲和层析柱；
将所述提取的蓝藻细胞总蛋白于所述亲和层析柱进行过柱；
所述PH450酶诱导剂包括利福平和依非韦伦；所述利福平在蓝藻培养基中的浓度为0.8mmol/L；所述依非韦伦在蓝藻培养基中的浓度为0.4mmol/L；所述蓝藻为瑞士纳沙泰尔湖水晶蓝藻或“水生1042号”蓝藻；
获取所述蓝藻并进行大量培养，并在培养过程中用PH450酶诱导剂进行诱导步骤中，还包括：
向蓝藻培养基中添加瑞格列奈，所述瑞格列奈在蓝藻培养基中的浓度为0.1mmol/L；
以所述多克隆抗体作为亲和介质制备亲和层析柱步骤中，所述亲和层析柱采用的固相基质为Sepharose CL 4B；
将所述提取的蓝藻细胞总蛋白于所述亲和层析柱进行过柱步骤之前，还包括：
将所述提取的蓝藻细胞总蛋白进行梯度沉降处理；
将所述提取的蓝藻细胞总蛋白于所述亲和层析柱进行过柱步骤之前，还包括：
将所述提取的蓝藻细胞总蛋白用不含有所述多克隆抗体的空白层析柱进行过柱；
将所述提取的蓝藻细胞总蛋白于所述亲和层析柱进行过柱步骤之后，还包括：
用洗脱液对所述亲和层析柱进行洗脱，并收集洗脱组分；
将所述洗脱组分进行浓缩处理。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于深圳无斑时代科技有限公司，未经深圳无斑时代科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201510533850.2/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
