[发明专利]一种产纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌植物亚种菌株

说明书

【技术领域】

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种产纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌植物亚种菌株。

【背景技术】

纤维素资源是地球上最廉价、最丰富的可再生资源之一。但由于其分子结构的特殊性及其在自然界中存在的特殊性，纤维素资源不但没有得到合理充分的开发利用，而且焚烧或弃置对环境造成环境污染。产纤维素酶的纤维素分解菌降解纤维的机理是通过与粗纤维的附着、粘连、穿透等一系列作用，产生纤维素酶将纤维的各组分进行分解，纤维素被逐步转化成葡萄糖或单细胞蛋白质等，进一步转成酒精等，不可可以减少环境污染，还是在能源、饲料、食品、纺织、造纸等方面得以高效利用，带来巨大经济效益和社会价值。从微生物中筛选新的生物活性物质已成为新的研究热点。纤维素酶是能够将纤维素降解转化横葡萄糖的一组酶的总称，广泛存在于细菌中。芽胞杆菌是一类产芽胞的细菌，在各个行业具有应用价值和经济效益。目前，具有产纤维素酶的解淀粉芽胞杆菌的文献报道甚少，而且酶活很低。

【发明内容】

本发明所要解决的技术问题在于提供一种产纤维素酶的解淀粉芽胞杆菌植物亚种菌株FJAT-29941(Bacillusamyloliquefacienssubsp.plantarum)，于2015年02月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNO.10558。

本发明是通过以下技术方案解决上述技术问题的：

本实验室取的福建省漳州市甘蔗研究所实验基地采集的植物玫瑰茄根系土壤，并将采集到的土壤通过分离与筛选得到一株能够产纤维素酶的菌株，鉴定该菌株的形态学、生理生化学特征、及测定其16SrRNA序列并进行比对分析，最终鉴定其为解淀粉芽胞杆菌植物亚种的一个菌株。

本发明的有益效果在于：提供了一种能够产纤维素酶的解淀粉芽胞杆菌植物亚种菌株FJAT-29941(Bacillusamyloliquefacienssubsp.plantarum)，且所产的纤维素酶的酶活良好，从而拓宽了优良纤维素酶的来源，为更多的纤维素酶应用提供了可能。

【附图说明】

下面参照附图结合实施例对本发明作进一步的描述。

图1是本发明中PCR产物的1.5％琼脂糖凝胶电泳图。

图2是本发明中酪氨酸的标准曲线图。

【具体实施方式】

本发明一种产纤维素酶的解淀粉芽胞杆菌植物亚种菌株FJAT-29941(Bacillusamyloliquefacienssubsp.plantarum)是从福建省漳州市甘蔗研究所实验基地的植物玫瑰茄根系土壤中分离、筛选出能够产纤维素酶的菌株，从而拓宽了纤维素酶的来源。

为了对本发明进行详细阐述说明，申请人给出了如下具体实施例。

实施例1该菌株FJAT-29941的分离与筛选

(1)样品的采集：取福建省漳州市甘蔗研究所实验基地的植物玫瑰茄根系土壤，装入无菌采集袋中，置于4℃保存，备用；

(2)菌株的分离：取土壤10g于90mL无菌水中，充分振荡后吸取1mL进行梯度稀释，选用稀释度为10^-1，10^-2，10^-3；接着将土壤稀释液涂布于细菌培养基平板上，于15℃下培养3-5d；之后将培养获得的菌落采用连续划线法接种于细菌培养基平板上，于15℃温度下纯化培养72h，获得纯菌株；

(3)菌株的筛选：将分离所得的纯菌株采用点接法接种于纤维素钠液体培养基(CMC-Na)，30℃培养48h，之后加入1mg/mL刚果红溶液，染色1h，弃去染液，加入1moL/LNaCl溶液，洗涤1h；最后挑选产透明圈的菌株即得到产纤维素酶的菌株；为了方便描述，将该筛选所得到的菌株命名为菌株FJAT-29941。

在本发明中，细菌培养基平板的组分为：蛋白胨10.0g、牛肉浸膏3.0g、NaCl50.0g、水1000mL，pH7.2-7.4；纤维素钠液体培养基(CMC-Na液体培养基)的组分为：羧甲基纤维素钠1％、胰蛋白胨1％、酵母浸膏0.5％、NaCl0.5％，pH9.5，琼脂18g、水1000mL。需要说明的是，本发明中各培养基组分中的百分数在无特殊指明的情况下则均为质量百分数。

实施例2该菌株FJAT-29941的鉴定

(1)形态学的鉴定：