[发明专利]一种巨核祖细胞制剂及其应用、制备方法

说明书

本发明涉及干细胞制剂技术领域，特别涉及一种巨核祖细胞制剂及其应用、制备方法。该巨核祖细胞制剂包括巨核祖细胞、人血白蛋白、干细胞生长因子、白细胞介素‑2和红花注射液。本发明巨核祖细胞制剂对于血小板缺乏症具有显著的改善作用，输注后的患者体内血小板含量恢复正常水平后，能在体内维持较长一段时间，使用后无任何不良反应，使用安全，且制备简单，使用方便。

技术领域

本发明涉及干细胞制剂技术领域，特别涉及一种巨核祖细胞制剂及其应用、制备方法。

背景技术

数量足够且功能正常的血小板是止血过程中不可或缺的一环，血小板的正常值约为150～450×10^3/mm³，因此广义的说，少于15万就可称为血小板缺乏(Thrombocytopenia)。国外曾直接从5600～9100位胎儿取用脐带血来检验血小板数，发现新生儿血小板缺乏的比例约为0.7～0.9％(Sola et al.,2000)。血小板缺乏症也是新生儿加护病房(NICU)中最常见的出血性疾病。如今，造血干细胞移植已广泛应用于临床治疗恶性及非恶性血液病、实体瘤、遗传代谢性疾病、自身免疫性疾病等。在造血干细胞移植中，受者的造血系统经预处理后严重受损，骨髓抑制，血小板减少，发生血小板缺乏症，且其恢复较慢，易导致出血乃至死亡。

然而对于血小板缺乏症的治疗，主要是直接回输血小板，把血小板收集浓缩起来，然后配合生理盐水，回输至患者体内，从而达到快速补充血小板数量的效果。但回输血小板价格昂贵，而且反复输注血小板可能会面临血小板输注无效，此外，一些血小板生成刺激因子如血小板生成素(TPO)，可能使患者出现骨髓纤维化和骨髓增生性紊乱等副作用。

巨核细胞(Megakaryocyte)是骨髓中的一种从造血干细胞分化而来的细胞，是正常骨髓中的一种能生成血小板的成熟细胞，前身为颗粒巨核细胞。该细胞体积巨大，成熟的巨核细胞边缘部分破裂脱落后形成血小板。每个巨核细胞平均能生成2000个(200～7700个)左右的血小板。巨核细胞虽然在骨髓的造血细胞中为数最少，仅占骨髓有核细胞总数的0.05％，但其产生的血小板却对机体的止血功能极为重要。巨核细胞是从骨髓中的造血干细胞分化发展来的。造血干细胞首先分化生成巨核祖细胞，也称巨核系集落形成单位(colony forming unit-megakaryocyte，CFU-Meg)。祖细胞阶段的细胞核内的染色体一般是2-3倍体。当祖细胞是2倍体或4倍体时，细胞具有增殖能力，因此这是巨核细胞系增加细胞数量的阶段。当巨核祖细胞进一步分化为8-32倍体的巨核细胞时，胞质开始分化，内膜系统逐渐完备。最后有一种膜性物质把巨核细胞的胞质分隔成许多小区。当每个小区被完全隔开时即成为血小板，血小板通过静脉窦窦壁内皮间的空隙从巨核细胞脱落，进入血流。

有报道用脐带血巨核系祖细胞和人血清白蛋白制备成巨核祖细胞注射液，能够改善放化疗引起的血小板减少综合症。但该注射液的治疗效果不理想，且易发不良反应。因此，临床急需一种治疗效果显著且无不良反应的巨核祖细胞制剂。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种巨核祖细胞制剂及其应用、制备方法。该巨核祖细胞制剂对于血小板缺乏症具有显著的改善作用，输注后的患者体内血小板含量恢复正常水平后，能在体内维持较长一段时间，使用后无任何不良反应，使用安全，且制备简单，使用方便。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种巨核祖细胞制剂，包括巨核祖细胞、人血白蛋白、干细胞生长因子、白细胞介素-2和红花注射液。