[发明专利]香菇多糖的提取方法

说明书

技术领域

本发明属于生物提取技术领域，具体涉及香菇多糖的提取方法。

背景技术

香菇多糖是香菇的重要化学成分之一，能增强腹腔巨噬细胞的吞噬能力，提高机体抗肿瘤功效且无毒副作用，是理想的免疫促进剂。香菇中多糖成分复杂，主要有葡萄糖、木糖和半乳糖组成，香菇多糖的抗肿瘤活性与分子量有关。然而，香菇多糖由于提取工艺落后，得到的产品呈黄褐色，这是由于香菇多糖中色素含量较多，影响了香菇多糖的色泽，不仅如此，杂质含量过高的香菇多糖的抗肿瘤活性也较差。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种香菇多糖的提取方法，该方法得到的香菇多糖纯度高、颜色正，且抗癌活性好。

本发明提供的技术方案是香菇多糖的提取方法，包括以下步骤：

1)将香菇破碎，用6～12倍重量80～95v％乙醇回流提取2～3次，每次回流2～3h，过滤，取滤渣备用；

2)将滤渣用6～12倍重量的水回流提取2～3次，每次提取2～3h，过滤，收集滤液备用；

3)将滤液浓缩至60℃下相对密度为1.15～1.25的浸膏，加入乙醇沉淀，离心得沉淀；

4)将沉淀依次用2～4倍重量的无水乙醇、丙酮分别洗涤，将洗涤后的沉淀用2～4倍蒸馏水溶解，过截留分子量为100万的中空纤维膜，收集浓缩液，然后将浓缩液过截留分子量为180万的中空纤维膜，收集透过液离心，过滤，取滤液备用；

5)取滤液喷雾干燥，即为香菇多糖。

步骤3)中，往浸膏中加入90～95v％的乙醇至乙醇含量为80～85v％。

步骤4)中，洗涤后的沉淀溶于蒸馏水后，先过截留分子量为100万的中空纤维膜，这样活性分子量低于100万的多糖以及低聚糖、单糖和色素均随着透过液流出，收集的浓缩液过截留分子量为180万的中空纤维膜，大分子蛋白质以及分子量高于180万的多糖被截留，收集透过液。

本发明两次过中空纤维膜，不仅可以最大程度地去除杂质和色素，以保证成品纯度和色泽，且提取得到的香菇多糖分子量在100万～180万之间，其抗肿瘤活性比其他区间范围内的多糖活性高。

具体实施方式

以下具体实施例对本发明作进一步阐述，但不作为对本发明的限定。

实施例1

1)将香菇破碎，用6倍重量80v％乙醇回流提取2次，每次回流2h，过滤，取滤渣备用；

2)将滤渣用6倍重量的水回流提取2次，每次提取2h，过滤，收集滤液备用；

3)将滤液浓缩至60℃下相对密度为1.1的浸膏，往浸膏中加入90v％的乙醇至乙醇含量为80v％沉淀，离心，得到沉淀；

4)将沉淀依次用2倍重量的无水乙醇、丙酮分别洗涤，将洗涤后的沉淀用2倍蒸馏水溶解，过截留分子量为100万的中空纤维膜，收集浓缩液，然后将浓缩液过截留分子量为180万的中空纤维膜，收集透过液离心，过滤，取滤液备用；

5)取滤液喷雾干燥，即为香菇多糖。用苯酚-硫酸法测定多糖含量为90.0％，颜色为灰白色。

对照组

1)将香菇破碎，用6倍重量80v％乙醇回流提取2次，每次回流2h，过滤，取滤渣备用；

2)将滤渣用6倍重量的水回流提取2次，每次提取2h，过滤，收集滤液备用；

3)将滤液浓缩至60℃下相对密度为1.1的浸膏，往浸膏中加入90v％的乙醇至乙醇含量为80v％沉淀，离心，得到沉淀；

4)将沉淀依次用2倍重量的无水乙醇、丙酮分别洗涤，将洗涤后的沉淀用2倍蒸馏水溶解，上D303型大孔树脂，用水洗脱至流出液无色透明，收集流出液，浓缩，喷雾干燥，即为香菇多糖。用苯酚-硫酸法测定多糖含量为85.1％，颜色为浅黄色。

实施例2

1)将香菇破碎，用12倍重量95v％乙醇回流提取3次，每次回流3h，过滤，取滤渣备用；

2)将滤渣用12倍重量的水回流提取3次，每次提取3h，过滤，收集滤液备用；

3)将滤液浓缩至60℃下相对密度为1.3的浸膏，往浸膏中加入95v％的乙醇至乙醇含量为85v％沉淀，离心，得到沉淀；

4)将沉淀依次用4倍重量的无水乙醇、丙酮分别洗涤，将洗涤后的沉淀用4倍蒸馏水溶解，过截留分子量为100万的中空纤维膜，收集浓缩液，然后将浓缩液过截留分子量为180万的中空纤维膜，收集透过液离心，过滤，取滤液备用；

5)取滤液喷雾干燥，即为香菇多糖。用苯酚-硫酸法测定多糖含量为91.3％，颜色为灰白色。

实施例3