[发明专利]关于红心火龙果籽白蛋白多肽、制备及应用在审
申请号: | 201510542852.8 | 申请日: | 2015-08-31 |
公开(公告)号: | CN105061572A | 公开(公告)日: | 2015-11-18 |
发明(设计)人: | 叶亚东;叶季峨 | 申请(专利权)人: | 常州亚当生物技术有限公司 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C07K1/16;C07K1/14;A61K38/56;A61P39/02 |
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地址: | 213022 江苏省常*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 关于 红心 火龙果 白蛋白 多肽 制备 应用 | ||
技术领域
本发明涉及红心火龙果籽多肽领域,具体涉及红心火龙果籽白蛋白多肽制备领域。
背景技术
火龙果含有一般植物少有的植物性白蛋白,营养丰富、功能独特,是一种消费概念上的绿色、环保果品和具有一定疗效的保健营养食品。据报道,火龙果籽的营养尤为丰富,主要富含植物白蛋白。由于工业废水、废弃物处理回收未获重视,以致各种水资源受到了严重重金属污染,除了直接饮用水中毒外,人类摄人食品重金属含量超标也易中毒。而白蛋白在人体内遇到重金属离子时,会自动与重金属离子结合,由排泄系统排除体外,起到解毒的作用。
红心火龙果的营养价值远远高于普通的火龙果。现阶段,没有从红心火龙果籽中提取白蛋白的报道。也没有关于红心火龙果籽中白蛋白多肽用于解毒的报道。
发明内容:
发明目的:
本发明的目的是提供一种从红心火龙果籽中提取的白蛋白多肽,以及制备方法和应用。
技术方案
本发明的技术方案为红心火龙果籽白蛋白多肽,其序列为GPQQGHQILQQCCSELRQEEPV。多肽制备步骤包括(1)将红心火龙果籽从果肉中取出,晾干后,用粉碎机粉碎;(2)红心火龙果籽粉末100g加入100-500ml75%乙醇中,超声萃取;(3)离心2000-3000rpm,10-30分钟,取上清;(4)加入pH4-5的缓冲液中,搅拌;(5)离心10000-15000rpm,10-30分钟,收集沉淀物;(6)将沉淀物复溶于pH7-9的缓冲液中,采用凝胶层析色谱柱分离出单一的组分;(7)冻干,即得。其红心火龙果籽白蛋白多肽可用于去除农药残留,所述药物残留重金属砷、铅。
有益效益:
本发明的制备得到的红心火龙果籽白蛋白多肽,经蛋白质序列测定,序列为GPQQGHQILQQCCSELRQEEPV,纯度大于85%。体外实验表明,该多肽能与砷、铅等重金属形成络合物,从而降低农药残留,如重金属砷、铅在体内的吸收。
具体实施方式
实施例1
将红心火龙果籽从果肉中取出,晾干后,用粉碎机粉碎;将红心火龙果籽粉末100g加入100ml75%乙醇中,超声萃取;离心2000rpm,10分钟,取上清;在上清中,加入pH4.5的缓冲液中,搅拌;离心10000rpm,30分钟,收集沉淀物;将沉淀物复溶于pH7的缓冲液中,采用凝胶层析色谱柱分离出单一的组分;冻干,即得。采用固相蛋白质自动测序仪测定该多肽的序列为GPQQGHQILQQCCSELRQEEPV,纯度为96.3%。
实施例2
将红心火龙果籽从果肉中取出,晾干后,用粉碎机粉碎;将红心火龙果籽粉末100g加入500ml75%乙醇中,超声萃取;离心3000rpm,15分钟,取上清;在上清中,加入pH5的缓冲液中,搅拌;离心15000rpm,60分钟,收集沉淀物;将沉淀物复溶于pH9的缓冲液中,采用凝胶层析色谱柱分离出单一的组分;冻干,即得。采用固相蛋白质自动测序仪测定该多肽的序列为GPQQGHQILQQCCSELRQEEPV,纯度为85.1%。
实施例3
测定实施例1得到的多肽降低铅溶液中铅离子浓度的作用:取1mg/L的硝酸铅溶液2ml,共个实验4管,分别加入纯净水、1、2、4mg/ml的多肽,搅拌后,静置15分钟,离心15000rpm,10分钟后,取上清溶液。采用铅离子的原子吸收光谱法进行测定。结果显示,水、1、2、4mg/ml的多肽中铅的浓度分别为:0.86、0.43、0.24、0.05μg/L。本实验重复3次。由此可见,本发明制备的多肽可以显著性降低铅溶液中铅离子的含量。
实施例4
测定实施例1得到的多肽降低铅溶液中砷离子浓度的作用:取标准砷溶液(1ug/ml)2ml,共个实验4管,分别加入纯净水、1、2、4mg/ml的多肽,搅拌后,静置15分钟,离心15000rpm,10分钟后,取上清溶液。采用砷斑法进行砷含量的测定。结果显示,水、1、2、4mg/ml的多肽中铅的浓度分别为:0.70、0.36、0.21、0.12μg/ml。本实验重复3次。由此可见,本发明制备的多肽可以显著性降低砷溶液中五价砷离子的含量。
SEQUENCELISTING
<110>常州亚当生物技术有限公司
<120>关于红心火龙果籽白蛋白多肽、制备及应用
<130>
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