[发明专利]一种活性猪脑多肽的制备方法

权利要求书

1.一种活性猪脑多肽的制备方法，包括以下工段：（一）猪脑组织的收集、（二）猪脑胶原蛋白的提取、（三）猪脑胶原蛋白的酶解、（四）猪脑多肽的分离、（五）猪脑多肽的活化，其特征在于：

（一）猪脑组织的收集

将新鲜或冷冻的胎猪脑组织在室温下用超纯净水洗净，加入质量百分比为3-5倍的无菌超存水，采用涡轮式搅拌器进行搅拌，形成均匀的猪脑蛋白浆液，脱水后得到纯净的猪脑组织；

（二）猪脑胶原蛋白的提取

用质量百分比为1.0-5.0%的醋酸对所述的猪脑组织进行浸泡预处理，水洗后用60-85℃的热水抽提4-10h得到猪脑明胶提取液，将所述提取液浓缩至胶原蛋白质量百分比浓度为15-25%的猪脑胶原蛋白；

（三）猪脑胶原蛋白的酶解

在所述的猪脑胶原蛋白中加入丝氨酸蛋白酶,采用酶解得到猪脑多肽混合液；

（四）猪脑多肽的分离

将所述的猪脑多肽混合液加入有机溶剂，充分搅拌后静置5-8h，离心去除沉淀，用切向流超滤设备截留上清液，取分子量小于3000Da的多肽提取物，进行除菌过滤；

（五）猪脑多肽的活化

将所述的猪脑多肽提取物采用二苯酯磷酰杂环化合物对猪脑多肽中的羟基进行活化，得到活性猪脑多肽。

2.根据权利要求1所述活性猪脑多肽的制备方法，其特征在于：在步骤（三）所述酶解工艺条件：丝氨酸蛋白酶添加量为猪脑胶原蛋白质量百分比的1.0-6.0%，pH值3-7，温度为45-60℃，时间为4-10h。

3.根据权利要求1所述活性猪脑多肽的制备方法，其特征在于：在步骤（四）所述有机溶剂为二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、醋酸、乙腈中的一种。

4.根据权利要求1所述活性猪脑多肽的制备方法，其特征在于：在步骤（四）所述除菌过滤采用膜过滤法，所述膜的孔径为0.45-0.2μm。

5.根据权利要求1所述活性猪脑多肽的制备方法，其特征在于：在步骤（四）所述离心去除沉淀，离心速率为7000-9000转/min，离心分离时间为10-30min。