[发明专利]一种萜类化合物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及化合物生产领域，尤其是一种萜类化合物的制备方法。

背景技术

萜类化合物(Terpenoids)是一类骨架多样、数量庞大、生物活性广泛的一类重要的天然药物化学成分。中药甘遂的主要成分就是此类化合物，包括三萜类和二萜类化合物，而假白榄酮型二萜类化合物是甘遂二萜类成分之一，多为一个5元环与一个12元环骈合在一起而形成,同时某些位置的羟基形成醚或酯桥。kansuininB(甘遂宁B)就是其中一种，具有广泛的生物活性，其结构如下：

目前发现，kansuininB有抑制细胞分裂的活性，在抗肿瘤作用方面有一定的生物学活性，特别是在抗肝癌细胞方面。

研究表明，kansuininB存在于甘遂中。现行《中国药典》收录的甘遂为大戟科大戟属植物甘遂的干燥块根。性寒,味苦；有毒。现代研究表明,甘遂化学成分具有抗肿瘤活性、抗生育、抗病毒、抗胰腺炎、泻下和免疫抑制等作用。

但是关于甘遂的化学成分，传统提取方法都是通过液液萃取的方式进行，该种方法存在以下缺陷：(1)批次之间不具有重复性，即无法保证第一批萃取得到的物质组分与第二批萃取得到的物质组分之间的一致性；(2)物质在不同溶剂中的分配过程需要的时间非常长，而且要多次萃取(一般三次，每次换新的溶剂)、然后合并，这导致整个提取过程的时间周期长，试剂耗费量大。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种萜类化合物的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种萜类化合物的制备方法，具体步骤如下：

(1)制备甘遂粗提物：以甘遂为原料，磨成粉末状得到干燥的甘遂粗粉，将甘遂粗粉用乙酸乙酯在60℃下浸泡5h，其中，甘遂粗粉与乙酸乙酯的用量比按料液比kg:L计为1:(3-8)，提取1-3次，静置过夜，取上清，过滤，所得滤液进行旋转蒸发至干，溶于乙醇体积分数为10-50％的乙醇-正己烷溶液中，进行减压抽滤，得到甘遂浓度为50-500mg/mL的提取液；

(2)对所得到的提取液进行一维液相色谱分离：采用的流动相为二元混合有机相，其中A相是正己烷，B相是乙醇；进样量为50-300mL/针；流动相流速为600mL/min；检测器为紫外检测器，检测波长200-260nm；梯度洗脱方式，0-37.5％B洗脱30min，100％B洗脱10min；根据紫外吸收光谱收集其中的GS-7峰(18.6-20.7min)作为目的组分，旋转蒸发浓缩至干，得到一维分离组分；

(3)用乙醇体积分数为10-50％的乙醇-正己烷二元混合溶剂溶解一维液相组分，溶解至浓度为50-100mg/mL；

(4)进行二维液相色谱分离：采用的流动相为二元混合有机相，其中A相是正己烷，B相是乙醇；进样量为0.1-1.0mL/针；流动相流速为10-18mL/min；检测器为紫外检测器，检测波长200-260nm；10-27％B梯度洗脱样品25min；根据紫外吸收光谱收集其中的GS-7-6峰(保留时间19-22min)作为目的组分，旋转蒸发浓缩至干，得到二维液相组分；

(5)用乙醇体积分数为10-50％的乙醇-正己烷二元混合溶剂溶解二维液相组分，溶解至浓度为50-200μg/mL；

(6)进行三维液相色谱分离：采用的流动相为二元混合有机相，其中A相是正己烷，B相是乙醇；进样量为5-100μL/针；流动相流速为1-5mL/min；检测器为紫外检测器，检测波长200-260nm；25％B等度洗脱21min；根据紫外吸收光谱收集其中的GS-7-6-1峰(15.7-18min)目的组分，旋转蒸发浓缩至干，得到目的产物萜类化合物甘遂宁B(kansuininB)。

优选的，上述萜类化合物的制备方法，所述步骤(1)(2)(4)(6)中减压浓缩采用旋转蒸发仪进行，工艺条件为真空度0.05-0.08Mpa、温度50-60℃。

优选的，上述萜类化合物的制备方法，所述步骤(2)中一维液相色谱分离采用的色谱柱为正相硅胶轴向加压色谱柱，填料为AgelaInnovalsilica(250mm×150mm；10μm,)，使用时柱温为室温或25-40℃。

优选的，上述萜类化合物的制备方法，所述步骤(4)中二维液相色谱采用的色谱柱为：AcchromX-Amide色谱柱(250mm×20mm；10μm，)，使用时柱温为室温或25-40℃。