[发明专利]一种大肠杆菌无细胞体系生产HIV-1 gp41重组抗原的方法在审
申请号: | 201510546412.X | 申请日: | 2015-08-31 |
公开(公告)号: | CN105039379A | 公开(公告)日: | 2015-11-11 |
发明(设计)人: | 徐志南;黄磊;来力;庄冰佳;蔡谨 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C07K14/16;C07K1/22 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 邱启旺 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 大肠杆菌 细胞 体系 生产 hiv gp41 重组 抗原 方法 | ||
1.一种大肠杆菌无细胞体系生产HIV-1gp41重组抗原的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)合成HIV-1gp41重组抗原全长基因,所述HIV-1gp41重组抗原全长基因的基因序列如序列SEQIDNO.1所示;
(2)将HIV-1gp41重组抗原全长基因克隆到pIVEX2.4c质粒上,得到重组载体pIVEX2.4c-gp41;
(3)将步骤(2)得到的重组载体pIVEX2.4c-gp41放到大肠杆菌无细胞体系中表达,同时在体系中添加去污剂,所述去污剂为Brij78或Brij58,在大肠杆菌无细胞体系中的质量体积分数为5g/L;
(4)利用亲和层析纯化分离,超滤浓缩后得到HIV-1gp41重组蛋白。
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