[发明专利]一种SVF的制备方法在审
申请号: | 201510548691.3 | 申请日: | 2015-08-31 |
公开(公告)号: | CN105132500A | 公开(公告)日: | 2015-12-09 |
发明(设计)人: | 李青峰;李华;成琴芳 | 申请(专利权)人: | 李青峰 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C12N5/077 |
代理公司: | 上海湾谷知识产权代理事务所(普通合伙) 31289 | 代理人: | 倪继祖 |
地址: | 200011 上海市黄*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 svf 制备 方法 | ||
1.一种SVF的制备方法,其特征在于,包括以下具体步骤:
步骤1:将抽吸的人体脂肪静置至脂肪和液体分层,去除所述液体,用生理盐水洗涤所述脂肪两次后,将所述脂肪装于无菌离心管中,并加入胶原酶溶液和生理盐水,所述胶原酶溶液与所述脂肪的体积比为1:10;
步骤2:将所述无菌离心管倾斜放置于恒温摇床中,37℃温度下消化30-90分钟,所述恒温摇床的振荡频率每分钟300-400次以上;
步骤3:将所述无菌离心管放入离心机中离心10分钟,离心力为300-400g,在无菌环境下吸出上层清液,在下层中加入10ml生理盐水重悬,并通过100μm单细胞滤网过滤,去除滤液,滤渣备用;
步骤4:将步骤3中的滤渣离心洗涤两次,离心力为600-700g,每次3-5分钟,即得所述SVF。
2.如权利要求1所述的一种SVF的制备方法,其特征在于,所述步骤1的详细操作如下:将抽吸的人体脂肪静置至脂肪和液体分层,去除所述液体,用生理盐水洗涤所述脂肪两次后,将10ml所述脂肪装于50ml无菌离心管中,并加入1ml胶原酶溶液,随后加入生理盐水至所述无菌离心管中的总溶液体积达20ml为止。
3.如权利要求1或2所述的一种SVF的制备方法,其特征在于,所述胶原酶溶液的制备方法如下:在600单位胶原酶中加入2ml生理盐水,充分混合,即制得胶原酶溶液,所述胶原酶溶液的浓度为1mg/ml。
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