[发明专利]大白花杜鹃无菌苗菌根化技术

说明书

技术领域：

本发明涉及一种大白花杜鹃(Rhododendrondecorum)无菌苗菌根化方法，特别是一种将大白花杜鹃和真菌共培养形成菌根苗的方法。，属于植物和真菌共生形成菌根的生物技术领域。

背景技术：

大白花杜鹃(Rhododendrondecorum)属于杜鹃花科杜鹃花属植物。其树姿优美，花色洁白，味清香，集观赏与食用价值于一身，在杜鹃花栽培过程中，杜鹃花极易因根系不发达而导致植株死亡，所以在引种驯化和产业化过程中，杜鹃花由于根系差而影响营养生长和株型，导致质量下降的情况屡见不鲜。

发明内容：

本发明的目的是提供大白花杜鹃(Rhododendrondecorum)无菌苗菌根化方法，使之形成发达根系，提高植株成活率，保证在栽培过程中植株能够正常生长，为提高杜鹃花商品质量提供理论指导和技术支撑。

为了实现本发明的目的，本发明提供了如下的技术方案：

大白花杜鹃无菌苗菌根化技术，其特征在于先选取大白花杜鹃的种子进行无菌苗的培育，再接种菌粒的培养，最后加入菌粒和杜鹃类接种菌剂建立一个共培养体系，用于菌根苗的合成。，

取健康、饱满的大白花杜鹃种子先用无菌水冲洗后，再采用0.1％升汞溶液进行表面消毒3-5分钟，然后无菌水冲洗7-8遍，放入灭菌的培养皿中进行萌发。

从已纯化的菌种中挑取的菌丝加入液体真菌培养基中，养基为马铃薯葡萄糖培养基(PDA)：200g/l去皮马铃薯+20g/l葡萄糖+3g/l磷酸二氢钾+1.5g/l硫酸镁+10mg/l维生素B₁，pH5.8；封口后放于国产回旋振荡器HY-5中，在黑暗，21-25℃条件下培养一个月得到用于接种的菌粒。

待无菌苗发芽长出两片真叶后，无菌条件下将其移栽至装有0.5％水琼脂的培养瓶中，然后加入菌粒，同时倒入液体真菌培养基，pH自然，培育菌根苗合成，培养菌根苗合成10天后，即可取小苗根系观察菌根的形成情况。

所述种子发芽、接种菌剂培养及菌根苗合成的温度为20-25℃，湿度30-45％，光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光1500-2000LUX。

一种大白花杜鹃无菌苗菌根化技术组培繁殖及菌根苗合成方法，其特征在于选取健康、饱满的大白花杜鹃种子，先用无菌水冲洗后，再采用0.1％升汞溶液进行表面消毒3-5分钟，然后无菌水冲洗7-8遍，放入灭菌的培养皿中进行萌发；

从已纯化的菌种中挑取一定量的菌丝加入液体真菌培养基中，封口后放于国产回旋振荡器HY-5中，在黑暗，21-25℃条件下培养一个月得到用于接种的菌粒；

待无菌苗发芽长出两片真叶后，无菌条件下将其移栽至装有0.5％水琼脂的培养瓶中，然后加入菌粒，同时倒入少量液体真菌培养基，从而建立了一套完整的共培养体系，用于合成菌根苗；培养10天后即可取小苗根系来观察菌根的形成情况。

本发明技术方案的提出是基于下述的研究基础：大白花杜鹃具很高的观赏和食用价值。杜鹃花为须根系，在栽培过程中极易因根系不发达影响营养生长和株型，导致质量下降甚至植株死亡。但是杜鹃花在生长过程中会与真菌形成一种互惠共生体，即菌根。菌根可以促进杜鹃花对水和营养物质的吸收，从而增强植物生存竞争的能力和耐性，使植物在恶劣条件下仍能存活。为提高杜鹃花引种驯化的成功率，培养出根系发达的高品质商品，推动我国花卉产业的发展，需要进行大白花杜鹃和真菌的菌根合成培养实验，摸索出合适的培养条件，并形成一套专门的菌根合成技术体系。

由于大白花杜鹃花种子苗的根系生长初期较细弱，易导致吸收水分和营养的能力不佳，本发明的优点在于：

1.通过接种菌根真菌，使幼苗根系发达，促进水分和营养吸收，为营养生长奠定良好的基础。

2.菌根苗在生存竞争能力和耐性方面远优于未形成菌根的植株，从而保证了植株的正常生长。

3.菌根苗的营养生长得到改善，可以极大地提高杜鹃花作为商品的质量和价格，为花卉产业化提供理论依据和技术支持。

本发明试验程序简便易行，杜鹃花无菌种子苗接种菌根真菌后，最快的在第5天即可培养出菌根苗，一个月后90％以上的杜鹃花苗根系可以形成菌根，极大地提高了幼苗菌根化的程度，增强了幼苗吸收营养水分的能力和恶劣条件下的耐性，为其健康生长提供了保证。

具体实施方式：