[发明专利]一株能够通过口服入血的噬菌体及其应用

说明书

本发明属于生物工程领域，提供了一株能够通过口服入血的噬菌体及其应用，该噬菌体单体为大肠杆菌噬菌体，拉丁名E.coli phage，被命名为Bp4，对大肠杆菌具有广谱的杀菌能力，噬菌体Bp4保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物学中心，保藏日期为2014年6月10日，保藏编号为CGMCC No.9248；该噬菌体对大肠杆菌具有强烈的裂解作用，为工业化生产噬菌体及用于鸡大肠杆菌病的防治及环境消毒提供了噬菌体来源，从而控制养鸡场严重的大肠杆菌病毒；该噬菌体可以用于工业生产，可由宿主菌大肠杆菌特异性扩增；该噬菌体可作为一种安全的生物消毒剂用于环境消毒；该噬菌体可作为生物类抗生素替代品应用于鸡场疾病控制。

技术领域

本发明属于生物工程领域，尤其涉及一株能够通过口服入血的噬菌体及其应用。

背景技术

噬菌体是一类感染细菌的病毒，可从污水或粪便等自然环境样本中分离得到。噬菌体具有严格的宿主特异性，大肠杆菌噬菌体只侵袭大肠杆菌，对人和动物细胞、植物细胞没有感染作用，所以噬菌体对人类或动植物没有感染性，也不会污染环境，安全性较高。噬菌体与相应的宿主菌接触后，就会触发噬菌体的吸附及胞内增殖过程，并通过宿主菌的裂解释放更多的噬菌体。噬菌体可通过这种途径在环境中通过杀灭特异的宿主菌得到自身的大量扩增，具有指数增殖特征，能作为一种具有杀菌作用的生物消毒剂和抗生素替代品。

许多肉鸡养殖场采用地面散养模式，肉仔鸡饲养到20日龄左右往往就会发生大肠杆菌病，抗生素治疗只能暂时控制其症状，并不能完全治愈，因此大肠杆菌病在肉仔鸡的饲养周期中持续不断地发生，给养殖业带来很大的经济损失。抗生素治疗往往面临细菌耐药性的问题，许多大肠杆菌的临床分离株表现为对多种抗菌药物同时耐药；肉鸡发生大肠杆菌病，会通过粪便排出致病性大肠杆菌，污染垫料，加上肉鸡地面散养过程中地面消毒的限制性，使大肠杆菌在环境中大量存在，增加了肉鸡感染大肠杆菌病的机会。

噬菌体消毒试验有过报道，但是口服后能入血且持续存在14h的噬菌体，且该噬菌体还能对鸡粪中的细菌总数及大肠杆菌数有明显消毒作用的噬菌体未见报道。

发明内容

本发明提供了一株能够通过口服入血的噬菌体及其应用，旨在解决抗生素治疗肉鸡大肠杆菌病面临的耐药性难题。肉鸡大肠杆菌病的抗生素治疗面临严重的细菌耐药性问题，地面散养的肉鸡场，其垫料的消毒常常无法进行。国内的研究者都做过很多类似的噬菌体消毒试验，但具有环境消毒作用且能通过口服入血的噬菌体未见报道。

本发明的目的在于提供一株具有口服入血能力的噬菌体，该噬菌体单体为大肠杆菌噬菌体，拉丁名E.coli phage，被命名为Bp4，对大肠杆菌具有广谱的杀菌能力，噬菌体Bp4保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物学中心，保藏日期为2014年6月10日，保藏编号为CGMCC No. 9248。

该噬菌体对大肠杆菌具有强烈的裂解作用，为工业化生产噬菌体及用于环境消毒和噬菌体治疗提供了噬菌体来源。

该噬菌体可用于工业生产，可由宿主菌大肠杆菌特异性扩增，可作为生物消毒剂应用于鸡场环境消毒及大肠杆菌病的噬菌体治疗。

该噬菌体Bp4作为消毒剂喷洒消毒于鸡粪时，它对鸡粪中的细菌总数及大肠杆菌数有明显的消毒效果，该噬菌体作为消毒剂用于鸡粪消毒且有明显的消毒效果。

该噬菌体可通过口服途径给肉鸡使用，能在14h内在血液中存在，为治疗鸡大肠杆菌病提供潜在的抗生素替代品。

噬菌体Bp4经双层平板法以24株鸡致病性大肠杆菌为对象，测定出噬菌体Bp4可以裂解24株致病性大肠杆菌中的8株，宽噬率为33%，这一结果说明该噬菌体是多价烈性噬菌体且具有较强的广谱性，在临床治疗上具有良好的应用前景。