[发明专利]云纹石斑鱼与鞍带石斑鱼的工厂化杂交育苗方法

权利要求书

1.云纹石斑鱼与鞍带石斑鱼的工厂化杂交育苗方法，其特征在于：

1）、亲本选择：云纹石斑鱼选择4龄以上健康雌性亲本，鞍带石斑鱼选择6龄以上健康雄性亲本；

2）、亲本培育：雌雄亲本分别放于不同培育池内；云纹石斑鱼养殖水温保持在20～26℃，鞍带石斑鱼养殖水温保持在25～30℃；

亲本培育过程中，通过调节亲鱼培育水温，实现对亲鱼性腺成熟的调控，从而控制育苗时间在每年6月份；具体措施为：云纹石斑鱼亲鱼从第一年的10月份开始，培育水温从25℃逐步降低至16℃再逐步升温至23℃不再升高，升温和降温频率控制在每7～10天升高或降低1℃，至第二年4月份达到性成熟；鞍带石斑鱼亲鱼从第一年的10月份开始，培育水温从29℃逐步降低到20℃再逐步升温至26℃，升温和降温频率控制在每7～10天升高或降低1℃，至第二年4月份准备产卵时，按照每3天升高1℃的频率，从26℃升高到28～29℃，此时鞍带石斑鱼达到性成熟；

3）、精子超低温冷冻保存及雌性亲本催产：第二年4月份开始进行鞍带石斑鱼精子超低温冷冻保存；按照精子与冷冻稀释液体积比1:1将精子加入到冷冻稀释液中，一并置于液氮中保存备用；挑选腹部明显膨胀，卵巢发育至Ⅳ期的雌鱼放养在培育池内，水温维持在22～24℃，对棕点石斑鱼雌鱼进行药物注射催产，将催产剂一次性进行鱼体注射，注射部位为背部肌肉；注射后效应时间为30～40小时；

4）、人工授精：对催产后腹部柔软轻压有透明卵流出的云纹石斑雌鱼，进行人工挤卵；将鞍带石斑鱼冷冻精液在38～40℃水浴中快速复温解冻，解冻后的精液加入28～29℃海水进行稀释，然后将精子和卵子混合均匀，实施干法授精。

2.如权利要求1所述的云纹石斑鱼与鞍带石斑鱼的工厂化杂交育苗方法，其特征在于：其中步骤2）中，亲本投喂饵料为鲐鱼、鲅鱼的任一种或者两种的任意比例混合投喂，水温≥24℃时2天投喂1次，20～23℃时每周投喂2次，每次投喂量占鱼体体重的1%。

3.如权利要求1所述的云纹石斑鱼与鞍带石斑鱼的工厂化杂交育苗方法，其特征在于：在第二年1月份实施营养强化，营养强化包括增加鱿鱼、维生素C、维生素E和裂壶藻。

4.如权利要求1所述的云纹石斑鱼与鞍带石斑鱼的工厂化杂交育苗方法，其特征在于：其中步骤3）中冷冻稀释液的配比是：每升含葡萄糖24g，氯化钠8g，碳酸氢钠0.08g，二甲基亚砜10mL，胎牛血清10mL，余量为去离子水。

5.如权利要求1所述的云纹石斑鱼与鞍带石斑鱼的工厂化杂交育苗方法，其特征在于其中步骤3）中注射所用催产剂制备方法是：取400～800IU/kg鱼体重的HCG和2～3ug/kg鱼体重的LRH-A3，混合后加0.9%的生理盐5ml/条鱼溶解。

6.如权利要求1所述的云纹石斑鱼与鞍带石斑鱼的工厂化杂交育苗方法，其特征在于：其中干法授精中，将受精卵放在孵化槽内，孵化20～24小时，收集上浮卵，收集后的上浮卵用海水冲洗2～3次，然用50ppm的聚维酮碘进行消毒，每10L消毒液每次不超过500ml受精卵，消毒时间5～10分钟，最后布池。