[发明专利]聚乙二醇修饰的GLP-1受体激动多肽及其应用

说明书

技术领域：

本发明涉及药物领域，具体涉及用于治疗糖尿病的GLP-1受体激动多肽。

背景技术：

糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病，是由于胰岛素不足或胰岛素的细胞代谢作用缺陷所引起的葡萄糖、蛋白质及脂质代谢紊乱的一种综合症。近年来，糖尿病患者的人数逐渐增多，分为I型糖尿病和II型糖尿病。其中II型糖尿病患者的人数占糖尿病总人数的85-90％，严重威胁着病人的健康和生命。如果糖尿病得不到良好的控制，可能引起很多并发症，例如：糖尿病肾病、视网膜病变、高血压等。

目前，大多数患者通过注射胰岛素或者口服降糖药物来帮助控制体内血糖，或调节胰岛素分泌等方法治疗糖尿病。但是这些药物副作用较大，临床上不能长期使用，不能满足糖尿病患者的临床需要。如果能够从自然产物中提取的安全、有效的治疗糖尿病的药物，将为广大糖尿病患者带来福音。

胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂被证实可呈葡萄糖依赖式的刺激胰岛素分泌，促进胰岛素合成；增加胰岛β细胞的数量并改善胰岛素抵抗。包括LEAD研究在内的多项研究证实，无论是联合还是单药使用，GLP-1受体激动剂利拉鲁肽均能有效降低2型糖尿病患者空腹血糖、餐后血糖及HbA1c，是一种能够使血糖全面达标的理想降糖药物。

MRLLPLLALLALWGPDPAAAFV是针对GLP-1开发的新型的激动剂多肽，是一个全新的序列。前期的研究表明，该多肽经反复体内外活性评价证实具有较好的降血糖的效果，能够显著激动GLP-1活性。然而上述多肽的半衰期短，这给糖尿病慢性疾病患者带来了的痛苦。

文献报道中，对分子结构进行修饰或改造是解决半衰期较短、需连续给药问题的常用方法，其中以化学修饰应用最为广泛，常用的化学修饰剂有聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)、葡聚糖、聚氨基酸、聚酸酐等。PEG具有无毒、无免疫原性、水溶性好的特点，被美国食品与药物管理局(FDA)认可作为药品的辅助原料和修饰剂。蛋白质类药物经PEG修饰后，分子量增加，肾小球的滤过率减少，PEG的屏障作用保护了蛋白质不易被蛋白水解酶水解，同时减少了中和抗体的产生，这些均有助于蛋白质类药物生物半衰期的延长。

发明内容：

本发明目的是针对现有GLP-1受体激动剂的特点，设计全新序列的GLP-1受体激动剂，更加适用于临床预防或治疗糖尿病的应用。

本发明技术方案是提供一种聚乙二醇修饰的GLP-1受体激动多肽，其序列为PEG-MRLLPLLALLALWGPDPAAAFV，PEG的分子量为1000-20000，用于预防或治疗糖尿病。

有益结果：

本发明中的聚乙二醇修饰的GLP-1受体激动多肽序列PEG-MRLLPLLALLALWGPDPAAAFV，可以靶向激动GLP-1受体，促进GLP-1受体产生的生理或病理的效应，达到预防或治疗糖尿病的效果。

发明人经过大量实验获知聚乙二醇修饰的GLP-1受体激动多肽能够有效的预防或治疗糖尿病。更优选是治疗糖尿病和/或糖尿病并发症药物中的用途。说明本发明设计的聚乙二醇修饰的GLP-1受体激动多肽科学、合理、可行有效，能用于治疗或预防糖尿病。

具体实施方式

本发明涉及多肽由上海生工合成。

实施例1

聚乙二醇修饰的GLP-1受体激动多肽的体外细胞活性测定

采用MTT比色法。将对数生长的胰岛瘤细胞(INS-1细胞)，以1.0×105加入96孔培养板中，培养24h，实验孔、阳性药物对照孔分别加入不同浓度的实验药物聚乙二醇修饰的GLP-1受体激动多肽；空白组加入相同体积的溶剂。每孔设五个复孔，培养48h，每孔加入MTT，作用4h后，加入DMSO，孵育30min，在酶标仪570nm处测定吸光度A值，按公式细胞生长增殖率＝(实验组吸光值/对照组吸光值-1)×100％。计算出实验药物的EC50为53.41nmol/L。

实施例2

聚乙二醇修饰的GLP-1受体激动多肽的体内降糖实验