[发明专利]一种真皮组织仿生多孔支架的制备方法

说明书

本发明公开了一种真皮组织仿生多孔支架的制备方法，通过将丝蛋白溶液与海藻酸溶液混合后进行水蒸气蒸发成膜，并对蛋白/海藻酸高分子膜采用氯化钙水溶液中孵育，最终经过干燥后制成所述真皮组织仿生多孔支架。本发明真皮组织仿生多孔支架材料可有效促进创面修复和抑制瘢痕形成，烧创伤等开放性伤口有很好的治疗效果。

技术领域

本发明涉及医用仿生材料技术领域，尤其是涉及一种以丝蛋白和海藻酸为原料，制备真皮组织仿生多孔支架的方法。

背景技术

烧创伤等开放性伤口所造成的皮肤缺损是临床常见病和多发病，在皮肤缺损修复过程中，伤口过度愈合会导致病理性瘢痕的发生和发展。病理性瘢痕包括增生性瘢痕和瘢痕疙瘩，会导致瘙痒、毁容、残疾等一系列严重的并发症，有时甚至诱发恶性肿瘤，严重降低患者的生存质量。因此，病理性瘢痕的防治一直是烧伤、整形等外科学领域中亟待解决的医学问题。

近年来，随着创面愈合机制研究的不断深入，人们认识到，瘢痕形成与真皮组织缺失程度具有高度相关性，这一理论在临床实践中得到了佐证，如浅度烧伤创面在愈合后新生组织与正常皮肤类似，而深度烧伤创面在愈合后将形成病理性瘢痕。这一理论提示：真皮组织的存在能够抑制瘢痕形成。因此，发挥真皮组织作用的真皮替代物已被临床用于促进深度皮肤缺损创面的愈合和抑制瘢痕形成。然而，现有真皮替代物仍然未达到抑制病理性瘢痕发生和发展的目标。目前，已上市真皮替代物产品可分为两类：脱细胞真皮基质和体外合成高分子支架。脱细胞真皮基质是由人尸体皮、猪皮、猪小肠粘膜下层经脱细胞处理所得到的成分异质的高分子支架材料，其主要成分为胶原蛋白。体外合成高分子支架是由合成高分子(如polyglactin)或动物源天然高分子(如胶原蛋白和/或糖胺聚糖)等体外合成的高分子支架。

已有仿真皮材料在促进创面修复和抑制瘢痕形成两方面发挥了有效作用，但在临床应用过程中仍然存在不足之处。首先，由于加工工艺难以控制，脱细胞真皮基质类仿生真皮的质量不稳定，各生产批次之间往往存在质量差别，这将影响其作为真皮替代物修复创面的应用效果，并可能造成二次手术等严重后果。其次，脱细胞真皮基质仿生真皮存在生物污染的可能性，由于原料人尸体皮可能携带病毒，并且这些病毒在材料加工过程中未被有效清除，而导致病毒传播。再次，体外合成仿生真皮在创面的降解速度与组织生成的速度不匹配，往往因降解过快而导致其促进伤口修复和抑制瘢痕形成的作用减弱。另外，现有仿生真皮在抑制瘢痕形成方面的作用效果远未达到促进功能性类真皮组织再生的目标。究其原因，仿生真皮在加工过程中结构被破坏和体外合成仿生真皮未实现对真皮组织的仿生是影响仿真皮材料促进真皮组织再生的重要因素。

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，本发明提供一种真皮组织仿生多孔支架的制备方法。本发明真皮组织仿生多孔支架材料可有效促进创面修复和抑制瘢痕形成，烧创伤等开放性伤口有很好的治疗效果。

本发明的技术方案如下：

一种真皮组织仿生多孔支架的制备方法，所述真皮组织仿生多空支架所含原料的质量百分数为：丝蛋白50％～90％，海藻酸10％～50％；具体制备步骤为：

(1)将蚕茧置于Na₂CO₃水溶液中沸煮30min，然后用去离子水润洗3次，制得蚕丝素纤维；然后将蚕丝素纤维置于溴化锂溶液中，37℃条件下溶解，制得丝蛋白溴化锂溶液；最后将所得溶液在截留分子量为3500Da的透析盒中透析3天后，得丝蛋白溶液，调节溶液质量百分浓度为5％；

(2)将步骤(1)制得的丝蛋白溶液与质量百分浓度为2％的海藻酸溶液在37℃条件下按体积比4～36:10混合，在速度为50rpm/min的漩涡振荡器上振荡5min，至混合均匀，然后在离心力为1500g下离心3min，除去溶液中的气泡；

(3)将步骤(2)离心后的混合液转移至聚四氟乙烯槽中，溶液的厚度为2mm，然后将此槽放置于37℃、吸风风速为0.3米/秒的通风橱中央，放置时间为24h，形成丝蛋白/海藻酸高分子膜；